溶剂化显色现象尤其利用Kamlet-Talf 公式近年来成为探索色谱保留值时髦的工具。这可从最近连续的报道中可以看出。不管研究流动相还是固定相其氢键效应仍然非常重要。Carr研究小组[10]仔细地测量了甲醇、乙腈、2—丙醇和四氢呋喃(THF)水溶液混合物的氢键给体酸度并讨论了相关的反相色谱保留值。Cheong和Choi[11]认为可以利用线性溶剂化能量关系预言保留值,为了获得合理的关联系数在保留值和溶质极性参数之间应排除强氢键力的溶质,他们假定可以利用在固定相上残余氢氧根离子同这些化合物特殊的相互关系做到这点。Carr小组[12] 另外也论述非常有价值的有关ET(30) 溶剂强度的限度,他们指出如果在整个溶剂范围内即从100%水到100%有机改良剂存在非线性化性,同时也应该再次强调,这也适合于别的单一参数溶剂,包括体积百分数对k’作图和溶剂强度参数S。三元流动相组成溶剂的选择性及特性也是人们感兴趣的研究内容。Levin 等[13] 提出一种在二元流动相相关实验基础上预言三元流动相的保留行为。Dzido 和Eegel-hardt 研究了单取代极性官能团芳香族烃类化合物选择性的变化,并且解释了分子形状大小、溶质和改良剂间的相互关系以及溶剂化络合物在固定相中先后次序的变化。Heron 和Tchapla[14] 研究了非水介质反相LC的溶剂选择,发现Kaelble 三角图比众所周知的Snyder三角图更为有效。
各种各样的研究有助于我们更好地理解流动相在保留过程中的作用。Chen和Pietrzyk表面选择性、有效性、线性烷基苯磺酸的分离度能通过流动相离子强度和电解质阳离子的选择得到提高。Busewski 等[15]研究了流动相组成关于烷基胺相的保留值和选择性的影响,Seibert 和 Poole应用一种溶剂化参数模型使丙腈硅烷固定相同甲醇、乙腈、2—丙醇和四氢呋喃流动相的保留性质特征化。流动相添加剂的研究也引起人们关注。McCrossen和Smpson研究戊腈和己腈作为流动相添加剂,发现加入少数的这类物质可引起保留值的明显变化还能明显改善有机胺的峰型。McCalley[16] 研究有机溶剂强度对一些基本化合物的峰型影响,发现THF和甲醇比乙腈作流动相有更好的色谱峰,尽管不同溶质的行为有相当大的变化。
Olesik 研究小组的兴趣也继续集中在流动相的“增强流动性”上。当少量的二氧化碳加到传统的反相色谱流动相时,其粘度减少,扩散系数增大,柱效提高。Lee和Olesik研究了结合升高温度可进一步增大扩散系数和柱效,Cui和Olesik[17] 报道过应用基础化学对这些方法的改进,指出除了降低粘度外,二氧化碳也能破坏甲醇—水混合物的氢键。
3
液相色谱的检测器
液相色谱中检测器是最脆弱的部分。八十年代初便有各种各样的检测器问世,但一般集中在高等院校和仪器公司里。有关检测器应用的论文成千上万。最流行的是可变波长检测器,而固定波长检测器由于最适合用于大范围的各种芳香化合物得到广泛应用。折光指数检测器,主要是应用空间排阻色谱在高分子工业以及食品和饮料工业中糖的检测,由于工业界很少发表所测得的结果,其论文数相对较少。发展最迅速的是开变波长光电检测器和电化学检测器。依赖使用的检测器合理检测峰型或试样纯度,用柱前和柱后衍生化技术和别的新技术(如化学放大或激光源使用)获得更多的信息。
除了早期LC书籍中所涉及的检测器外,还有许多现在HPLC检测器方面的综述[18]。随着后来发展,毛细管
液相色谱和毛细管电泳中使用敏感的吸收系数检测器,其一途径是论述了光照射晶轴得到明显的改进,另一途径论述了从吸附电解质到荧光物质增加到流动相中能量转换,用连续的次级发射改进检测限。Berthod 论述了LC中激光检测器的使用,他讨论LC检测器性能需要,相关激光性能,以及几个激光—LC相结合的例子,包括光扫描、荧光、光电离子化、热光离子化、折光率、光度和声光检测器。Dasgupta[19] 引用170篇参考文献论述柱后操作技术在
离子色谱(IC)中改进选择性和敏感度,Rochlin[20] 引用36篇文献比较不同类型的检测器。
液相色谱新的检测技术不断发展,以适应毛细管和微球柱大小的需要,Fielden论述了近几年正在迅速发展的
液相色谱检测技术,并将其分成二大领域,即光谱和电化学检测器,他也考虑到扩大柱后流动试剂检测领域。据此,Freeman 等论述了在
液相色谱中生物化学柱后反应检测技术,酶、蛋白质和抗体的使用从改进检测器选择性和敏感度角度讨论。Martin等人论述了当今控制环境污染分析和监测方面面临的挑战,他们检验了多种分析技术,包括一些
液相色谱仪,可以保证应用于控制环境污染问题,在相关的一篇综述中,Chau评价了可以提供分析金属离子的色谱技术,
液相色谱技术同特殊元素检测相结合,可以分离金属络合物结构,对于大气、水、残渣和鱼样的金属离子分析具有重要意义。
在近年来兴起的DNA分析领域中,已有不少人报道评价聚合酶链反应产品的
液相色谱分离和检测中定量分析准确度和精密度。Gaus描述了由PCR 允许的DNA放大技术准确定量,不需要放射性标记。在一项值得庆贺的研究中,Schmitt等论述了如何合同放大二极基因组的样品作为内标物,在PCR基础上,在各种细胞和组织中主要基因组样品和成纤维细胞增长因子b 的
液相色谱分析。
各种各样检测器的研究论文层出不穷,如紫外—可见光度检测器, 拉曼光谱检测器,荧光检测器,化学荧光检测器,质谱检测器,电化学检测器,核磁共振检测器以及光电二极管阵列检测器等等。总之,检测器的研究其共同的方向均朝着灵敏度高、重新性好、相应快、线性范围宽、适应范围广、对流动相流量和温度波动不敏感、死体积小等特性。