主题:【讨论】理论塔板数的疑惑

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fengmo4668
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为什么我的色谱柱,随着保留时间的延迟,理论塔板数越来越大了呢?

理论塔板数不是应该是色谱柱的一个衡量参数,应该是一个固定值的呀(或者叫理论常数),不应该变的呀?
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dahua1981
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理论塔板数(theoretical plate number),N色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:   理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)   柱效率用理论塔板数定量地表示:N=16*(t/w )2。其中,t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间,w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。在一色谱柱中用相同的洗脱条件时候,不同化合物的滞留时间与其洗脱峰宽度之比接近常数。因此理论塔板数大的色谱柱效率高。当然,N的大小和柱子长度有密切关系:理论塔板高度H=柱长/N,用H可以衡量单位长度的色谱柱的效率,H越小,则色谱柱效率越高。。。   N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。   用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。   N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)   若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2
fengmo4668
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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:

理论塔板数(theoretical plate number),N色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:   理论塔板数=5.54(保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)   柱效率用理论塔板数定量地表示:N=16*(t/w )2。其中,t是溶质从进样到最大洗脱峰出现的时间,w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。在一色谱柱中用相同的洗脱条件时候,不同化合物的滞留时间与其洗脱峰宽度之比接近常数。因此理论塔板数大的色谱柱效率高。当然,N的大小和柱子长度有密切关系:理论塔板高度H=柱长/N,用H可以衡量单位长度的色谱柱的效率,H越小,则色谱柱效率越高。。。   N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。   用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。   N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)   若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2


百度百科中的解释,看过了,没有解决我的问题。呵呵,
不过还是谢谢dahua!
richies
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不会理论塔板数越来越大,柱子时间做的长了,应该塔板下降,塔板数与分离效果是正比关系
fengmo4668
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原文由 richies(richies) 发表:
不会理论塔板数越来越大,柱子时间做的长了,应该塔板下降,塔板数与分离效果是正比关系


对呀,我也是这样想的,所以很纳闷为什么塔板数越来越大。

难道,是因为我以前的塔板数是不正常的?后面变大的才是越来越正常了?
richies
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fengmo4668
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原文由 richies(richies) 发表:
难道,你的工作站的计算方法有问题?


这个,可能性应该也不大吧,我关注一下看。
richies
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原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
原文由 richies(richies) 发表:
难道,你的工作站的计算方法有问题?


这个,可能性应该也不大吧,我关注一下看。


对于一个样品,一个色谱分离条件下,柱子使用时间长,理论塔板数会下降,如果改变样品或者条件,塔板数没有确定值

另,如果今天这个样品塔板数低点,明天高点,后天又低了,这个是正常现象,持续走高是不对的
小虾米
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