主题:【求助】瘦肉精回收率低,是步骤问题还是其他问题呢?

浏览0 回复38 电梯直达
sukiliang
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上个星期刚忙完省的瘦肉精的能力比对,我们做的是猪尿的瘦肉精的检测,用1031气象色谱质谱这个方法来做的,但是结果出来的回收率偏低,基本是在60、70%左右,沙丁胺醇最差,低浓度的沙丁胺醇最差的回收率是45%,克伦特罗还比较正常,但是莱克多巴胺回收率偏高了,有100%多的。

当时的实验我们是用内标做的,但是回收率也很差,不知道问题出在哪里了!

基本上做实验的时候都很注意,调ph到5.20,——》加1ml的乙酸铵缓冲液——》挑ph9.50——》加Nacl——》混合液——》震荡——

离心——》吸取上清液(吸取的比较干净)——》氮气吹干(75.5摄氏度,没任何液体吹出)——》5ml乙酸铵缓冲液——》机器过柱(当时我建议用人工过

柱,无奈高级兽医师说要用机器过柱)——》基本上后面的步骤和标准相同! (最后定容到0.2ml)

请教各位大侠,应该要特别注意哪些步骤,才能是使回收率做得更好呢?记得上一年我师父做了猪肝的省能力比对,回收率百分百,

那位高级xxx的数据还要猜来猜去。可惜师父现在走了,希望各位大侠指点一二
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pingguwu
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哈哈,有内标应该做得不错。提取也可能偏低,过柱也可能损失。
sukiliang
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原文由 pingguwu(pingguwu) 发表:
哈哈,有内标应该做得不错。提取也可能偏低,过柱也可能损失。


是应该做得不错的,但是问题就是做得回收率太差了

- -!不过某高工亲自做的标准曲线只达到一个9!

请问会不会是因为是机器过柱出现问题呢?
semibeauty
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氮吹要那么高温度吗?
绝对回收率我也做不高,但是用内标校正后的相对回收率还可以了
善良的鬼
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sukiliang
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氮吹要那么高温度吗?
绝对回收率我也做不高,但是用内标校正后的相对回收率还可以了


= =!那你们的温度大概是多少呀?
sukiliang
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氮气吹的是不是太干了,一般氮气都是吹到近干。


= =!反正我们那些吹得都看到白色的残渣才叫干
semibeauty
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氮吹要那么高温度吗?
绝对回收率我也做不高,但是用内标校正后的相对回收率还可以了


= =!那你们的温度大概是多少呀?


我是45度,貌似还没看到过你那么高的氮吹温度的。。你试试降低看看
sukiliang
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氮吹要那么高温度吗?
绝对回收率我也做不高,但是用内标校正后的相对回收率还可以了


= =!那你们的温度大概是多少呀?


我是45度,貌似还没看到过你那么高的氮吹温度的。。你试试降低看看


好的,谢谢你了,我试试!
wjl0220
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尿的检测pH值是关键因素,做尿要经过酶解后,用乙酸乙酯提取,再用0.1mol/L的盐酸反提取,用氢氧化钠调节pH只6.0,然后过阳离子交换柱就可以了,这样既可以保证3中检测目标物的稳定性,也可以去除杂质。
hujiangtao
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沙丁胺醇水溶性太强
在提取的时候加一些氯化钠效果会好一些
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