主题：【第六届原创】【原创】制备色谱技术

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sally0326

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发表于：2011/12/07 13:58:17 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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各位用液相的都知道，制备的手段在现在的，真是各种各样，比如说前沿一点逆流色谱了、SFC了，或者是常听到的中低压制备、flash、闪谱、高压制备等等，真是数不胜数啊，那制备色谱究竟都是些什么东东呢？我们大家来讨论下吧，小妹在此抛砖引玉，希望大家补充：

一、定义：

广义的来说，制备色谱主要包含以下几个方面
1、薄层色谱——制备型薄层色谱（PTLC）、离心薄层色谱；
2、特殊柱色谱——干柱色谱、减压液相色谱；
3、制备型加压液相色谱——中低压制备色谱（MPLC）、高压制备色谱（HPLC）、超临界液体色谱（SFC）；
4、制备气相色谱；
5、逆流色谱。
狭义上讲，目前主要说的制备色谱为第三个点，即制备型加压液相色谱。

下面我们主要介绍制备型加压液相色谱

二、基本原理：

在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短（由于各组分性质结构不同，与固定相作用的强弱有差异），从而按不同次序从固定相中流出，使不同组分得到分离。

加压制备色谱，是在分辨率、速度和上样量之间寻找一个平衡点，改变其中任意一个参数，都会牵动其他。例如增加载样量，则势必影响样品的分辨率，如果修改洗脱条件，增加分辨率，则速度又变慢。

三、制备色谱与分析色谱的区别：

制备型色谱与分析型色谱的区别主要是目的不同：分析型色谱的目的在于鉴定、鉴别；制备型色谱的主要目的是在混合物中分离得到纯化产物，是一个纯化过程。

分析色谱
• 数据的完整性
• 强调高柱效（1.7, 3, 5 um 填料）
• 强调样品的前处理，净化程度等

制备液相
• 物质的纯度
• 纯化产量，回收率等
• 过程消耗，成本等

四、分类
——低压液相色谱（＜75psi）
——中压液相色谱（75-300psi）
——高压液相色谱（＞300psi）
中低压液相制备色谱目前市面上有很多种叫法，闪谱、Flash色谱、中低压液相色谱、MPLC、过柱机等，其实都是一样，都是中低压制备色谱，只是叫法不同而已。

五、组成

——输液泵

分一元、二元、四元三种，一元只能实现等度洗脱。

——分离柱（Flash柱、玻璃柱、高压制备柱）

——检测器
紫外检测器（UV）/紫外-可见检测器(UV-VIS)
紫外检测器又分固定波长、可变单波长、可变双波长、DAD三维显示等）
示差检测器(RI)
蒸发光检测器(ELSD)

——收集器
全收集（all）：从样品分离开始到结束，按照设定的体积进行馏分的全部收集，不进行区分。
峰收集（peak、slope）：有阈值收集和斜率收集两种，阈值收集即按照峰高限制，进行收集；斜率收集时按照起峰的斜率（起峰线与基线之间形成的夹角），进行收集。
手动收集（manual）：完全以人的主观意识决定，可以参考谱图出峰信息，人为决定是否收集。
窗口收集（windows）：按照收集需要，设定一个时间窗口，并且可以和阈值结合进行收集组合，满足条件下才会收集。

另可以咨询厂家收集器是否能进行自定义功能，方便你根据自己的需要，自定义各种实验室容器收集。比如说可以再收集托盘上摆满烧瓶，收集后直接旋蒸，节省收集试管到烧瓶中的转移时间，避免转移浪费。

——控制系统
硬件方面：触摸屏工控机、外配电脑、触摸屏+内存条
软件方面：收集显示、在线修改梯度等。

——进样系统
液体进样
固体进样
进样阀

一般情况下中低压系统接口都是标准的luer接口，可以不用配进样系统，液体进样直接用注射器与柱子相连注射即可，固体进样购买一个空柱管或者是专门设计的进样管（上样管）即可；高压系统由于压力与接口等原因，简单配置来说一定要有一个手动流通进样阀，高配需要有一个自动进样系统。

看看下面这些仪器，你们实验室都有么？你们还有哪些制备的仪器呢？不妨拿出来秀一秀。