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主题：【原创】液相色谱仪的选购参考

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发表于：2011/12/16 15:09:32 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液相色谱仪的选购参考

随着科技的发展，实验技术的要求，液相色谱仪已经遍布各大高校，研究所，医院，生化企业实验室等等。而市场上的液相色谱仪是五花八门，每个仪器的不同部件的性能又是多钟多样，相对于时间紧缺的实验人员来说，也没有很多精力去逐个挑选甄别。因此在此对液相色谱仪做个简单分析。

液相色谱仪由包括输液系统，进样系统，分离系统，检测系统，数据处理系统，输助设备(色谱柱恒温箱等)几大部分组成的。但是在机器工作的同时还需要样本处理设备的支持。只有各个部分都能协调的运作才能发挥出机器的最佳的性能。因此我们在选择仪器的时候需要充分考虑到仪器的方方面面才能拿到自己满意的机器。

首先从常规的几个部件做个简单的分析。

（一）输液泵应具备如下性能：

① RSD（流量稳定性）<0.3%;

② 流量范围宽， 0.1～5.0ml/min内连续可调，有的实验则需要更大流量;

③ 输出压一般应能达到150~400 kg/cm2,流量越大,最高压力越低;

④ 液缸容积小,有助于减少流动相死体积，利于清洗。

⑤ 密封性能好，耐腐蚀。

（二）检测器

①紫外检测器，分为可变单波长检测器VWD和二极管阵列检测器DAD，可以检测有紫外吸收的物质

②荧光检测器，检测有荧光的物质

③视差折光检测器，通用型检测器，但对环境要求极为苛刻，而且灵敏度低

④ELSD，蒸发光散射检测器

⑤MSD，质谱检测器

常用的是紫外检测，然后是MSD和ELSD

（三）色谱柱

　要求柱效高、选择性好，分析速度快等。目前市场上销售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、氧化铝、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。

一般的分析只需5000塔板数的柱效;同系物分析500即可;难分离物则可用2万的柱子。

因此一般10~30cm左右的柱长基本能满足复杂混合物分析的需要。所以要根据自己实际情况来选择合适的柱子。

柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。       

此外，温度在色谱分析中是个不容忽视的环境条件，环境温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的性能、流动相的粘度都有影响。而且不同的检测器对温度的敏感度不一样。保持恒定的温度对实验而言是个绝对不容忽视的条件，因此也要留意注温箱的选择。以保证实验结果的准确性。

（四）进样器

进样装置要求：密封性好，重复性好，死体积小，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。而且进样方式多种多样，可分为隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。自动进样器则是市场发展的趋势。

（五）数据处理系统

一般专业的液相色谱仪生产厂家都有自己配套的液相色谱仪控制软件。但有不少液相色谱仪可以使用通用型的色谱数据工作站进行数据计算处理。进口软件价格比较高，这个自己得根据资金选择了。
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2011/12/16 15:10:10 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
接上
（A）对于品牌而言

进口的沃特世（Waters）、安捷伦（Agilent）、日本岛津（Shimadzu）、美国科学系统（SSI）、戴安（Dionex）、 PE（PerkinElmer）、瓦里安（Varian，被安捷伦收购）、热电（Thermo）、日立（Hitachi、天美代理）、日本分光（Jasco、华洋科仪代理）、德国诺尔（Knauer）、贝克曼（Bekman）等等。

Agilent、Waters用户还是比较多的,岛津也还行。缺点是都价格太高。

Agilent近期的型号1100,（停产了）、1200、1290、1120。都是十几万、几十万的。

Waters 2695用的挺不错，价格得四五十万，小实验室实在担待不起。（不过我朋友搞到的才十八万）

如果能拿到比较好的二手的进口仪器也是不错的选择，优点是价格低，缺点不用说了吧。曾接触过的两个二手

齐羿科技，还有个基泰

以上信息仅供参考！
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2011/12/16 15:11:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
(B)国产的有大连依利特、赛智科技（杭州）有限公司、北分瑞利、莱伯泰科（北京）、北京创新通恒、北京温分、北京东西电子、苏州岛津、上海天美、上海伍丰、上海通微、南京科捷、浙江福立等（网上找的，不知道是不是这些）。

国产的最大优势在与价格！！这与中国的生产环境是相关的，但低价对于资金不足的同行会是比较好的考虑，但质量与国外知名品牌而言还是有差距的。主要是仿制国外的。据说售后做的也不怎么样，为了压低成本。因为没有接触过，实在说不清楚。

有钱的找质量好的，售后服务周到的。
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2011/12/16 15:13:10 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
补充一个：
二元泵和四元泵的区别二元有两个泵，泵后混合，气体的溶解度随压力的增大而增大，所以二元高压混合不会产生气泡。四元只一个泵（另外一个是辅泵），是泵前混合，在常压下进行的，两种液体混合时，会降低气体在混合溶液中的溶解度，通常会有气泡产生，所以四元低压梯度系统一定要配在线真空脱气机
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fengmo4668
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2011/12/16 16:15:13 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
说的不是一般的老到！厉害！
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thinkingchina
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2011/12/16 17:00:47 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
二元泵和四元泵的区别

二元有两个泵，泵后混合，气体的溶解度随压力的增大而增大，所以二元高压混合不会产生气泡。

四元只一个泵（另外一个是辅泵），是泵前混合，在常压下进行的，两种液体混合时，会降低气体在混合溶液中的溶解度，通常会有气泡产生，所以四元低压梯度系统一定要配在线真空脱气机。

噪声的大小直接关系到仪器的检测灵敏度，噪音越大，检测的灵敏度就越低。噪音过大将导致基线不稳，进而影响分析结果。
动态噪音：整个流路单元及检测单元都在工作时的噪声，能够最直接的反映仪器系统的噪声大小。
静态噪声：由仪器的光学部件与电子部件所产生的噪声，仅仅说明了检测单元的噪声大小，并没有涉及到流路单元，而流路单元却恰恰是系统噪声的主要来源，在仪器的使用过程中是不可避免的。有些公司，包括一些进口品牌生产商在对外宣传时片面地强调空池噪声，而闭口不谈动态噪声，这是不科学的。我们在检测样品的时候哪有不需要输液单元的呢？动态噪声才是仪器所必需注重的指标，也是影响用户分析的重要因素
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thinkingchina
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2011/12/16 17:05:42 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
agilentDAD检测器
"简介：光电二极管阵列检测器，简称PDA( Photo-Diode Array)检测器或DAD
(Diode Array Detector)检测器，是80年代发展起来的一种新型紫外检测器，
其工作原理如下:光源经一系列光学反射镜进人流动池，从流动池出来的光再经分光系统、狭缝照射到一组光电二极管上，数据收集系统实时记录下组分的光谱吸收，得到三维的立体谱图。
用一组光电二极管同时检测透过样品的所有波长紫外光，而不是某一个或几个波长，和普通的紫外-可见分光检测器不同的是进人流动池的光不再是单色光。它具有以下优点:(1)可得任意波长的色谱图，极为方便;(2)可得任意时间的光谱图，相当于与紫外联用;(3)色谱峰纯度鉴定、光谱图检索等功能，可提供组分的定性信息
膜）真空箱和一个真空泵构成。打开真空脱气机的电源开关后，控制电路即开启
真空泵，真空泵运行使真空箱内产生部分真空。其压力由压力传感器测定。根据
压力传感器的信号，真空脱气机通过打开或关闭真空泵来维持部分真空。"
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thinkingchina
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2011/12/16 17:06:49 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
AgilentVDW检测器                   
新一代的Agilent 1100 系列可变波长检测器 (VWD)通过显著降低基线噪音，并提供更宽的线性动态范围（即使在环境温度和湿度条件差或波动大的情况下），极大地改善了这类应用。另外， 1100 系列VWD SL Plus数据采集速率可高达 160 Hz，能满足Agilent 1100系列快速分离液相色谱系统最快速分离的要求。
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happy爱米粒
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2011/12/17 9:04:35 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主说的主要还是针对普通的HPLC吧？现在市场UPLC究竟有没有取代HPLC呢？
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小虾米
wuxia330
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2011/12/17 14:49:28 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
讲解的十分厉害
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hanbo1983
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2011/12/17 18:09:40 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
戴安已被热电收购了，楼主信息不灵通哟！
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