主题:【分享】[实验室安全] 正确使用DEPC

浏览0 回复1 电梯直达
省部重点实验室
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
DEPC这个东西让人又爱又恨的,还是讲讲如何正确使用它吧!DEPC有致癌性,不能处理Tris溶液等这些事项大家都知道,所以不谈。谈一些实验室中的操作误区。

误区一:重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。由于DEPC较贵,而且书上说DEPC要用高压灭菌处理去除,于是有些人就萌发了重复使用DEPC的想法,即对含有DEPC的水不进行高压灭菌,从而重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。节约本是好事,但这样的节约是无效的。为什么不能重复使用含DEPC的水,因为DEPC在水溶液中不稳定,极易分解,DEPC在pH6.0和pH7.0的PBS缓冲液中的半衰期分别约为20min和10min,DEPC在水中的半衰期约为30min。因此,重复使用含DEPC的水就不能保证枪头和离心管的RNase-free。
误区二:必需长时间高压灭菌来彻底去除DEPC。用DEPC处理过的溶液,在15-20min的高压灭菌后还可以闻到一股特殊的香味,因此有人认为高压灭菌去除DEPC不彻底,所以要延长高压灭菌的时间以完全去除DEPC。但是延长高压灭菌的时间并不需要,因为闻到的特殊香味不是DEPC的,而是DEPC分解产物之一的乙醇同溶液中残留的微量的羧酸(如甲酸和乙酸等)反应产生的挥发性脂类。这种特殊的水果香味不代表有痕量的DEPC残留。
误区三:溶液中DEPC含量约高,灭活RNase的效果越好。这个误区错了一半,的确,1% DEPC能灭活高达1000 ng/ml的RNase A,而0.1% DEPC只能灭活少于500 ng/ml的RNase A。但是溶液中残留的DEPC副产物会抑制一些酶反应,例如DEPC副产物会抑制体外转录反应,因此DEPC含量越高,高压灭菌后的DEPC副产物就越多,抑制越明显。
为您推荐
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
tangtang
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
不熟悉这个,只能百度了:

DEPC毒性
  1.DEPC(diethypyrocarbonate,焦碳酸二乙酯) 是一种高效烷化剂。配置:加0.1% DEPC到去离子水中,混匀过夜,然后高温高压121℃, 20min, DEPC即降解成二氧化碳和水无毒。
  2.DEPC有刺激性,对眼睛气道粘膜有强刺激,在操作中应尽量在通风的条件下进行,DEPC毒性并不是很强,但吸入的毒性是最强的,使用时戴口罩,不小心占到手上注意立即冲洗。
  3.DEPC是一种潜在的致癌物质,主要是能生成乙酯基衍生物和乙酯类衍生物,其中尿烷是一种已知的致癌物质。
  DEPC水泡过一次枪头后还能再用吗?是否每次都要重配?
  答:不能再用。每次处理耗材时都要用新配的。
  DEPC水用于配制电泳缓冲液和溶解RNA.
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴