主题:【分享】核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准

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核酸及蛋白质常用数据

1.核苷三磷酸的物理常数



化合物

分子量

λmax(pH7.0)

1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值

OD280/OD260

ATP

507

259

15400

0.15

CTP

483

271

9000

0.97

GTP

523

253

13700

0.66

UTP

484

262

10000

0.38

dATP

494

259

15200

0.15

dCTP

467

271

9300

0.98

dGTP

507

253

13700

0.66

dTTP

482

267

9600

0.71



2.常用核酸的长度与分子量



核酸

核苷酸数

分子量

λDNA

48502(双链环状)

3.0×107

pBR322

4363(双链)

2.8×106

28SrRNA

4800

1.6×106

23SrRNA

3700

1.2×106

18SrRNA

1900

6.1×105

19SrRNA

1700

5.5×105

5SrRNA

120

3.6×104

tRNA(大肠杆菌)

75

2.5×104



3.常用核酸蛋白换算数据



  (1)重量换算

  1μg=10-6g      1pg=10-12g

  1ng=10-9g      1fg=10-15g

  (2)分光光度换算:

  1A260双链DNA=50μg/ml

  1A260单链DNA=30μg/ml

  1A260单链RNA=40μg/ml

  (3)DNA摩尔换算:

  1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端

  1μg pBR322 DNA=0.36pmol

  1pmol 1000bp DNA=0.66μg

  1pmol pBR322=2.8μg

  1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿

  1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿

  1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿

  (4)蛋白摩尔换算:

  100pmol分子量100,000蛋白质=10μg

  100pmol分子量50,000蛋白质=5μg

  100pmol分子量10,000蛋白质=1μg

  氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿

  (5)蛋白质/DNA换算:

  1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质

  10,000MW蛋白质=270bp DNA

  30,000MW蛋白质=810bp DNA

  50,000MW蛋白质=1.35kb

  100,000MW蛋白质=2.7kb DNA
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4.常用蛋白质分子量标准参照物



(1)高分子量标准参照(2)中分子量标准参照(3)低分子量标准参照
肌球蛋白分子量磷酸化酶B97,400碳酸酐酶31,00
肌球蛋白212,000牛血清白蛋白66,200大豆脻蛋白酶21,500
β-半乳糖甘酶B116,000谷氨酶脱氢酶55,000抑制剂
磷酸化酶B97,400卵白蛋白42,700马心肌球蛋白16,900
牛血清白蛋白66,200醛缩酶40,000溶菌酶14,400
过氧化氢酶`57,000碳酸酐酶31,000肌球蛋白(F1)8,100
醛缩酶40,000大豆脻蛋白酶21,500肌球蛋白(F2)6,200
抑制剂 肌球蛋白(F3)2,500
溶菌酶14,400


5.常用DNA分子量标准参照物



λDNA/HindⅢ

λDNA/EcoRⅠ

λ/HindⅢ+EcoRⅠ

pBR322/HaeⅢ

23130

21226

21227

587

123

9416

7421

5148

405

104

6557

5804

4973

504

89

4361

5643

4268

458

80

2322

4843

3530

434

64

2027

3530

2027

267

57

564

1904

234

51

125

1584

213

21

1375

192

18

974

184

11

831

124

7

564

125



常用抗生素溶液


抗生素

贮存液a

工作浓度

浓度

保存条件

严紧型质粒

松弛型质粒

氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)

-20℃

20μg/ml

60μg/ml

羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)

-20℃

20μg/ml

60μg/ml

氯霉素34mg/ml(溶于乙醇)

-20℃

25μg/ml

170μg/ml

卡那霉素10mg/ml(溶于水)

-20℃

10μg/ml

50μg/ml

链霉素10mg/ml(溶于水)

-20℃

10μg/ml

50μg/ml

四环素b5mg/ml(溶于乙醇)

-20℃

10μg/ml

50μg/ml



  a:以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。

  b:镁离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。
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