主题：【分享】固相萃取条件优化

        最近在郑州出差，在客户那里做固相萃取--HPLC，处理柴胡样品。对比了几个厂家的固相萃取柱，以及验证了全自动固相萃取仪器平行性。客户想了解固相萃取条件的优化，下面分享一下：

优化固相萃取参数
                   
        在建立了初步的固相萃取方法后就可以用空白样品添加目标化合物后对添加物进行萃取。然后，根据分析结果对初步的固相萃取方法进行优化，以达到最佳的效果。优化过程主要考虑的因素有：
                 
回收率是否达到检测要求？
能否将萃取过程缩短以提高效率？
能否将溶剂使用量减少以节省成本、提高效率、减少污染？
                     
        如果检测结果发现回收率较低，应该首先检查整个操作过程是否有错。如果没有，就要从方法本身查找原因了。可以从以下几个方面着手检查：
                 
1、  洗涤溶剂是否合适
                  理想的洗涤溶剂是溶于基质，但对目标物溶解度低。
2、目标化合物是否没有完全洗脱
                  选择更强的洗脱溶剂（如改变pH、离子强度、有机溶剂%含量）
                选择作用力相对较弱的SPE柱
3、目标化合物是否没有被完全吸附
                    可以采用原萃取方法以双柱叠加的方式将两个性质相同的固相萃取柱串连在一起进行柱 子预处理及样品添加操作，然后将两根柱子分开，分别对两根萃取柱洗脱。如果在下方的柱子上发现有目标化合物就表明目标化合物在萃取过程发生了穿透。也就是说目标化合物在样品添加过秤中没有按照方法设计要求不很好地吸附。有部分目标化合物在样品添加过程中随样品基质穿过固相萃取柱。发生穿透的原因可能是：萃取机理选择的不合适；固相萃取柱的吸附容量不够。目标化合物没有被完全吸附还有另外一种可能性就是对于某些样品来说，由于部分目标化合物没有呈游离状态。如生物样品中的目标化合物与蛋白质结合在一起，所以随着样品基质通过固相萃取柱。
4、目标化合物与固相萃取填料功能团之间的吸附作用过强
                洗脱溶剂的洗脱强度不足以将目标化合物全部洗脱下来。这种情况可以改用吸附力较弱 的固相萃取柱或改用洗脱强度更大地溶剂进行洗脱。

  在达到预期回收率的前提下，我们希望萃取过程越短越好。提高效率可以从以下几个方面入手：
                            1、提高流速。包括预处理溶液流速、样品过柱流速。
                            2、减少洗脱溶液的体积