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主题：【原创】提问帖（3.28）大家说说柱前以及柱后衍生的不同方法和这些方法的优缺点

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yifan1117
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2012/3/30 10:08:18 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
液相色谱中常用的柱前衍生化方法：
1. 紫外衍生化反应
    液相色谱使用最多的是紫外检测器，为了使一些没有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外检测器检测，往往是通过衍生化反应在这些化合物的分子中引入有强紫外吸收的基团（表10-2-15），这些衍生物可被紫外检测器检测。大多数紫外衍生反应来自经典的光度分析和有机定量分析，新的衍生化反应和衍生化试剂是随液相色谱发展而发展，这些反应的原理都来自有机合成，所以就要求操作者对有机合成有所了解。但是，由于柱前衍生化是为色谱分析准备样品，处理样品的量（mg 级）和所用的反应器皿（小型和微型）又不同于常量的有机合成，而是类似于近年来发展的微量有机合成。紫外衍生化反应要选择反应产率高，重复性好的反应。过量试剂和试剂中的杂质如果干扰下一步的色谱分离和检测，则在色谱进样前要进行纯化分离。还要注意反应介质对紫外吸收的影
响。
2. 荧光衍生化反应
    液相色谱中荧光检测器的灵敏度要比紫外检测器高出几个数量级，但是液相色谱能分离的对象，多数没有荧光，主要依靠荧光衍生化试剂通过衍生化反应在目标化合物上接上能发出荧光的生色基团，达到荧光检测的目的。由于荧光衍生物的激发波长和发射波长与荧光衍生试剂的不同，即使有过量的试剂或有反应副产物存在，也不会干扰荧光衍生物的检测，因此荧光衍生反应不需要纯化衍生物，可以直接进样。
3. 电化学衍生化反应
    液相色谱中的电化学检测器灵敏度高、选择性强，为临床、生化、食品等样品的分析提供了新的途径。但由于电化学检测器只能检测具有电化学活性的化合物，如果目标化合物没有电化学活性就不能被检测。此时只能与电化学衍生试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物。由于硝基具有电化学活性，一系列带有硝基的衍生化试剂与羟基、氨基、羧基和羰基化合物反应，可生成电化学活性的衍生物。
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丁度巴拉斯
v3055047
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2015/11/9 14:08:16 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
完全看不懂???慢慢学习
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