主题：【已应助】关于黄曲霉毒素检测问题的求助

原文由 20100830(20100830) 发表:
请问各位，现在有没有用液质来检测黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的国家标准呢？或者大家有没有这一方面的检测经验，可以给我做一下参考么？或者发一些资料给我，谢谢，万分感激

本人最近在试着做黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的检测，因为没有柱后衍生系统，所以想用液质来试着做，请求各位大侠能给一些资料给我做参考，谢谢啊

目前有用液质的国标方法，但毕竟液质不是每个小厂家小单位可以配备的，所以常用的还是用液相的，加衍生，其实买个光化学衍生装置没多少钱，大概1，2万吧！如果要长期做的话，建议还是买一个，省着自己的液质吧！

2011年新修订的国标《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒》，这个明确了限量值及检测方法，我手上有文件有需要的可以找我，站短留下自己的邮箱。

不知道楼主做什么样品的？乳品的检测国标有液质方法，食品中B1的检测没有液质方法，我这里都全，想要可以给我站短吧！

你搜索下迪马的SPE柱方法，不用衍生，你可以试试！

1 适用范围                                               

适用于牛奶、奶粉等乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。

2 样品准备/提取

2.1  牛奶、原料乳等液态 奶制品

(1)    称取2 g样品，加入2 mL乙腈，涡旋混合1 min；

(2)    再加入4 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；

(3)    取上清液4 mL，作为上样液待净化。

2.2  奶粉等固体奶制品

(1)    称取2 g样品，加入5mL水，涡旋混合2min，样品与水充分混匀；

(2)    加入5 mL乙腈，涡旋混合1 min；

(3)    再加入10 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；

(4)    取上清液5 mL，作为上样液待净化。

3 SPE柱净化——ProElutTM AFT 黄曲霉毒素检测专用柱1500 mg/12 mL（Cat.#65904）
(1)活    化：    10 mL乙腈，流出液弃去；
(2)上    样：    将上样液加入柱中（流速控制每滴/两秒），接收流出液；
(3)洗    脱：    10 mL乙腈洗脱（流速控制每滴/两秒），收集流出液。合 并步骤（2）、（3）流出液；
(4)重新溶解：    在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2 mL，向旋蒸瓶中加入5 mL无水乙醇，继续减压蒸馏完全干燥；
(5)衍    生：        依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10 min。然后挥干衍生 液，用10%乙腈水溶液定容至0.5 mL。


4 分析条件
色谱 柱：    Diamonsil C18（2），250×4.6 mm，5μm（Cat.#99603）
流  速：    1.0 mL/min
检测器：    荧光检测器，Ex:365 nm；Em:435 nm
柱  温：    30℃
进样量：    20 μL
流动 相：    A：水；  B：异丙醇+乙腈=3+2


梯度设置
时 间/min    0    5    15    20    21    30
A%    90    80    80    60    90    90
B%    10    20    20    40    10    10

谢谢分享十分感谢。以及个人收藏

原文由 20100830(20100830) 发表:

原文由 20100830(20100830) 发表:
请问各位，现在有没有用液质来检测黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的国家标准呢？或者大家有没有这一方面的检测经验，可以给我做一下参考么？或者发一些资料给我，谢谢，万分感激

本人最近在试着做黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的检测，因为没有柱后衍生系统，所以想用液质来试着做，请求各位大侠能给一些资料给我做参考，谢谢啊

采用柱前衍生就可以的

原文由 yalucy(yalucy) 发表:
1 适用范围                                               

适用于牛奶、奶粉等乳制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。

2 样品准备/提取

2.1  牛奶、原料乳等液态 奶制品

(1)    称取2 g样品，加入2 mL乙腈，涡旋混合1 min；

(2)    再加入4 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；

(3)    取上清液4 mL，作为上样液待净化。

2.2  奶粉等固体奶制品

(1)    称取2 g样品，加入5mL水，涡旋混合2min，样品与水充分混匀；

(2)    加入5 mL乙腈，涡旋混合1 min；

(3)    再加入10 mL乙腈，涡旋混合1 min，4000rpm，离心5 min；

(4)    取上清液5 mL，作为上样液待净化。

3 SPE柱净化——ProElutTM AFT 黄曲霉毒素检测专用柱1500 mg/12 mL（Cat.#65904）
(1)活    化：        10 mL乙腈，流出液弃去；
(2)上    样：        将上样液加入柱中（流速控制每滴/两秒），接收流出液；
(3)洗    脱：        10 mL乙腈洗脱（流速控制每滴/两秒），收集流出液。合 并步骤（2）、（3）流出液；
(4)重新溶解：        在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2 mL，向旋蒸瓶中加入5 mL无水乙醇，继续减压蒸馏完全干燥；
(5)衍    生：            依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10 min。然后挥干衍生 液，用10%乙腈水溶液定容至0.5 mL。

4 分析条件
色谱 柱：        Diamonsil C18（2），250×4.6 mm，5μm（Cat.#99603）
流  速：        1.0 mL/min
检测器：        荧光检测器，Ex:365 nm；Em:435 nm
柱  温：        30℃
进样量：        20 μL
流动 相：        A：水；  B：异丙醇+乙腈=3+2

梯度设置
时 间/min        0        5        15        20        21        30
A%        90        80        80        60        90        90
B%        10        20        20        40        10        10

这个方法需要用荧光检测器，不知灵敏度能做到多少？

原文由 20100830(20100830) 发表:

原文由 20100830(20100830) 发表:
请问各位，现在有没有用液质来检测黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的国家标准呢？或者大家有没有这一方面的检测经验，可以给我做一下参考么？或者发一些资料给我，谢谢，万分感激

本人最近在试着做黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的检测，因为没有柱后衍生系统，所以想用液质来试着做，请求各位大侠能给一些资料给我做参考，谢谢啊

液质倒是不需要衍生，可以按照国标液相方法的前处理（出去衍生化步骤），再用液质测定。最大的问题就是基质效应。标准品响应都还不错

原文由 小猪飞飞(zpf20031212) 发表:

原文由 20100830(20100830) 发表:

原文由 20100830(20100830) 发表:
请问各位，现在有没有用液质来检测黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的国家标准呢？或者大家有没有这一方面的检测经验，可以给我做一下参考么？或者发一些资料给我，谢谢，万分感激

本人最近在试着做黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2，M1的检测，因为没有柱后衍生系统，所以想用液质来试着做，请求各位大侠能给一些资料给我做参考，谢谢啊

液质倒是不需要衍生，可以按照国标液相方法的前处理（出去衍生化步骤），再用液质测定。最大的问题就是基质效应。标准品响应都还不错

现在主要是不知道B1,B2,G1,G2这几个的质谱设置参数，比如母离子，子离子的质荷比是多少，碰撞能量，裂解电压等这些，有谁可以给点参考么？

如图，仅供参考