分批阶段自溶。菌种
菌种是发酵过程的关键,没有好的种子等于无米之炊。这里说的菌种包括种子库和一级二级种子。如果出现自溶,首先要排除掉菌种的原因,否则可能会连累整个种子库。菌种出问题,有可能是菌种老化和菌种带杂菌或者噬菌体。
如果是单纯的菌种老化,可能会造成质粒脱落进而丧失抗性造成菌体自溶;可能造成抗噬菌体能力下降以致噬菌体侵入造成菌体自溶;
杂菌污染:杂菌生成的毒素等物质造成大肠死亡。
噬菌体:噬菌体有F+噬菌体与体噬菌体,烈性噬菌体和温和噬菌体之分。烈性噬菌体可在吸附后20-30分使菌体裂解;温和噬菌体也会在一定条件下释放造成菌体裂解。噬菌体是造成大肠杆菌自溶的一个非常重要的因素,下面会详细叙述。
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为了防止菌种培养过程中万无一失,需要做的
1 严格的菌种培养环境与菌种保藏环境,做到废液及时灭菌,不给噬菌体杂菌以传染的机会。
2购进的菌株或宿主必须首先进行噬菌体监测。
3严格的实验操作,操作台要整洁有序;甘油等储存液体即灭即用,做好传代记录以备查询。
4菌液培养过程中注意菌体的生长阶段,以对数生长期为佳。注意菌种的传代次数,防止传代过多造成质粒丢失或其他特性的丢失。
5合适的保藏方法。
6可以通过分离纯化等方法使菌种复壮。
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