(B)转化完整质粒,计算菌落生长数,测定转化效率。例如,将1 ug/ul质粒1:100稀释,1 ul用于100 ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000 ul后,用100 ul铺板。培养过夜,产生1000个菌落。转化率为: 产生菌落的总数/铺板DNA的总量。铺板DNA的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数。具体而言转化用10 ng DNA,用SOC稀释到1000 ul后含10 ng DNA,用1/10铺板,共用1 ng DNA。转化率为:1000克隆X10(3次方) ng /铺板1 ng DNA ug=10(6次方)cfu/ ug转化pGEM-T应用10(8次方)cfu/ ug感受态细胞如没有菌落或少有菌落,感受态细胞的转化率太低。