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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】PDA测适配子不出峰

浏览0 回复2 电梯直达
lixuan20091225
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发表于：2012/04/27 15:13:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您好，我是最近才开始接触毛细管电泳的。

在用PDA检测适配子（一种小片段单链的核酸），可是一直不出峰。冲洗条件正在优化，现在用的是：0.1M NAOH 10min-ddH2O 10min-0.1M HCL 10min-硼酸缓冲液50mmol/L PH 9 20min。进样时间是5秒，电压是10KV。样品的量是10ul的1pmol/ul的适配子+10ul的ddH2O。怎么也不出峰，电流稳定。样品的量也加到过10ul的5pmol/L+10ulddH2O，一样不出峰。

实在是不知道怎么办了！
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2012/4/27 17:16:43 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
波长多少？试一试不同波长看结果会如何。
另外核酸的紫外吸收比较弱，浓度比较低的话可能看不到。可以考虑往分离介质中加入溴化乙锭以提高检测灵敏度同时还能增加分辨率。
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ericwong
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2012/4/28 8:40:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
选用气动进样试试
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手机版： PDA测适配子不出峰
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