主题：【已应助】如何使用uplc-msms测已知结构的物质 流动相离子源的选择

原文由 木有才(xgy2005) 发表:

原文由 yangmumayi(yangmumayi) 发表:

原文由 Charles911(boyxinzhong) 发表:
保留比较弱，您可以试试HSS T3柱，会不会有所改善？它比C18对极性化合物保留更强一些

我这没有现成的HSS T3柱 买的话 估计得一个月
这种物质的pka 是3.9 文献上  用的都是加甲酸或乙酸 ESI+或-  我直接进质谱 怎么就打不出来物质呢 很烦人

T3不行的,PH范围2-8

还有一个 问题是 别人用hplc msms能搞定 为什么我搞不定呢

楼主是参考的文献吗？文献上也不一定都能重现。从结构上分析负离子模式还是比较靠谱的，不用氨水，直接上乙腈水试试怎样？您质谱方法做出来了，只是链接液相时峰不保留，对吧？

负离子模式用乙腈水有时候比较好一些

原文由 木有才(xgy2005) 发表:
楼主是参考的文献吗？文献上也不一定都能重现。从结构上分析负离子模式还是比较靠谱的，不用氨水，直接上乙腈水试试怎样？您质谱方法做出来了，只是链接液相时峰不保留，对吧？

对 你说的对 不加氨水 我用甲醇和水  试过 好像不保留 峰不太好 因为前几天晚上做的 当时 很疲惫很烦了 记不太清
我当时试过 甲醇 和 水 的  加氨水 什么都不加 加甲酸 三个组合 前两个在液相好像都不保留 不到1分钟 就出峰， 后面的没在质谱做出。

原文由 木有才(xgy2005) 发表:
负离子模式用乙腈水有时候比较好一些

没试过乙腈 和水 我4号试试 还有没有别的可行的方案呢 做不出来的话 我的实验就没法进行 毕业就成问题了 着急加烦啊

原文由 yangmumayi(yangmumayi) 发表:

原文由 木有才(xgy2005) 发表:
负离子模式用乙腈水有时候比较好一些

没试过乙腈 和水 我4号试试 还有没有别的可行的方案呢 做不出来的话 我的实验就没法进行 毕业就成问题了 着急加烦啊

嗯，负源做的不多，氨水这个东东用的时候一定要注意色谱柱的耐受性，还有毛细管电压那里电压不要加的太高，容易放电。乙腈和甲醇的选择性不一样，甲醇易形成加合物，而且是质子性溶剂，做质谱方法时最好连着流动相进行

原文由 木有才(xgy2005) 发表:

原文由 yangmumayi(yangmumayi) 发表:

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负离子模式用乙腈水有时候比较好一些

没试过乙腈 和水 我4号试试 还有没有别的可行的方案呢 做不出来的话 我的实验就没法进行 毕业就成问题了 着急加烦啊

嗯，负源做的不多，氨水这个东东用的时候一定要注意色谱柱的耐受性，还有毛细管电压那里电压不要加的太高，容易放电。乙腈和甲醇的选择性不一样，甲醇易形成加合物，而且是质子性溶剂，做质谱方法时最好连着流动相进行

我的毛细管电压是 3.5kv  做质谱的时候用的是连流动相了， 用LC-MS时用的是甲醇和水，upLCMSms时用的是纯甲醇（0.1%氨水）
甲醇 和 乙腈的选择性有什么不一样呢

upLCMSm木有水？只用了氨化甲醇一个流动相吗？负源3.5KV有点高，楼主是premierXE吗？

反相色谱法用的乙腈与甲醇的区别
1，首先，乙腈价格高
乙腈，特别是HPLC级的价格很高，但是，文献或LC厂家所示的条件，多用乙腈，这是为什么呢？现就此谈谈。
2，吸光度，乙腈HPLC级的小。乙腈和甲醇的市销HPLC级和优级的吸收光谱中，乙腈HPLC吸收最小（特别是在短波长上小）。所谓HPLC级是除去具有吸收UV的杂质，在规定的波长上吸光度限制在规格值以内。在UV检测时，产生的噪声小，因此在进行UV短波长上的高灵敏度分析时乙腈HPLC级最适宜。另外，在UV检测中的梯度基线上也是乙腈HPLC级产生鬼峰少，虽然，其他与水相溶性高的有机溶剂有各种各样，但很难能找到比乙腈HPLC级吸收更小的。另外，甲醇的HPLC级和优级，虽然所得的光谱相差不大，但是优级不能保证吸光度，有可能产生偏差，价格也相差不大，所以尽量使用HPLC级。
3，压力,乙腈低.柱内承受的压力,根据有机溶剂的种类或混合比率的不同而异,水/乙腈,水/甲醇混合液的比率与输液压力的关系中,甲醇与水混合,压力增高,而乙腈同样与水混合且并不如此.所以,乙腈一方,在同样的流速下不在柱内加上多余的压力.从上述两项,可以确认使用乙腈的意义,那么,甲醇除了价格以外,还有没有其化优点呢?
4,洗脱能力,一般而言,乙腈较强.乙腈和甲醇分别用同样的比率与水混合时,一般情况下,乙腈的洗脱能力强.特别是混合比率低时,从咖啡因和苯酚的洗脱来看,获得同样的保留时间,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可.另一方面,有机溶剂100%或与此极接近时,从胡萝卜素和胆甾醇来看,常常都是甲醇的洗脱能力强.混合比在50比1等较为特殊时,调制的误差大,影响保留时间,或平衡化的时间长,乙腈遇到这种情况时,用甲醇的10比1混合代替乙腈,这样操作方便些.溶剂受温度影响时,不采用容器定量,而采用重量的方法(考虑比重),可使混合比的误差减小.
5,分离(洗脱)的选择性.两者的差异,乙腈和甲醇在分离的选择性上不同.由于有机溶剂分子的化学性质(甲醇和乙醇是质子性,乙腈和四氢呋喃是非质子性)不同所致.因此,在用乙腈类不能获得分离的选择性,就试用甲醇类看看.

原文由 木有才(xgy2005) 发表:
upLCMSm木有水？只用了氨化甲醇一个流动相吗？负源3.5KV有点高，楼主是premierXE吗？

对 是哈 这有问题吗 听人说先用甲醇调 加不加水影响不太大