二、电泳仪
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳大类,自由界面电泳不需支持物,如等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。区带电泳需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶―G薄层等,分子生物学实验中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。下面以DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)为例介绍其使用方法。
1.使用方法
(1)按电源开关,显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设置。屏幕转成参数设置状态,见图一:
U: 0V U= 100V | Mode: STD
I: 0mA I = 50mA |
P: 0W P= 50W |
T: 00:00 T= 01:00 |
其中:左侧大写U: I: P: T: 为电泳时实际值;中间部分显示程序的常设值(预置值)。Mode(模式):STD(标准);TIME(定时);VH(伏时);STEP(分步)
(2)设置工作程序。用键盘输入新的工作程序。例如,要求工作电压U=1000V,电流I限制在200mA以内,功率W限制在100W以内,时间T为3小时20分,并且到时间自动关掉输出。则操作步骤如下:
①按“模式”键,将工作模式由标准(STD)转为定时(TIME)
模式。每按一下模式键,其工作方式按下列顺序改变: STD®TIME®VH®STEP®STD。
②先设置电压U,按“选择”键,先将其反显,然后输入数字键即可设置该参数的数值。按数字1000,则电压即设置完成。
③设置电流I,按“选择”键,先使I反显,然后输入数字200。
④设置功率P,按“选择”键,先使P反显,然后输入数字100。
⑤设置时间T,按“选择”键,先使T反显,然后输入数字320。如果输入错误,可以按“清除”键,再重新输入。
⑥确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声,提醒操作者电泳仪将输出高电压,注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“Run”,并有两个不断闪烁的高压符号,表示端口已有电压输出。在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒)。
⑦每次启动输出时,仪器自动将此时的设置数值存入“MO”号存储单元。以后需要调用时可以按“读取”键,再按“0”键,按“确定”键,即可将上次设置的工作程序取出执行。
⑧电泳结束,仪器显示:“END”,并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣。
2.注意事项
(1)U、I、P三个参数的有效输入范围是:U:5~3000V;I: 4~400mA;P:4~400W.
(2)一般情况下,当No Load!时,首先应关机检查电极导线与电泳槽之间是否有接触不良的地方,可以用万用表的欧姆档逐段测量。
(3)如果输出端接多个电泳槽,则仪器显示的电流数值为各槽电流之和,此时应选择稳压输出,以减小各槽的相互影响。
(4)注意保持仪器的清洁,不要遮挡仪器后方进风通道。严禁将电泳槽放在仪器顶部,避免缓冲液洒进仪器内部。
(5)本仪器输出电压较高,使用中应避免接触输出回路及电泳槽内部,以免发生危险。
(6)长期不用仪器,应放置在干燥通风的清洁环境中保存。
三、分析天平
分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动/全自动电光分析天平及电子分析天平等。目前实验室常规备用的是自动化程度较高的电子分析天平。下面介绍电子分析天平 PL203/01型和AL104/01型 (METTLER-TOLEDO)的性能及使用方法。PL203/01型精密电子天平:最大称量210g;实际分度值0.001g;AL104/01型高分辨率电子分析天平:最大称量110g;实际分度值0.0001g
1. 使用方法
(1)检查并调整天平至水平位置。检查电源电压是否匹配(使用配置的稳压器),按天平仪器要求通电预热至所需时间30min 。
(2)打开天平开关“on”,天平则自动进行灵敏度及零点调节。待显示屏上所有字段短时点亮,天平回零时,可进行正式称量。
(3)称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,天平将显示该重量,点击“O/T”键自动校对零,然后逐渐加入待称物质,直至所需重量为止。
(4)称量结束应及时除去称量瓶(纸),关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。
2. 注意事项
(1)天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥,同时应避免光线直接照射到天平上。
(2)称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。
(3)挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。
(4)电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周一次,每次预热2h,以确保仪器始终处于良好使用状态。