主题：【已应助】空白干扰+低浓度线性不好+响应值不稳定

原文由 chy57589893(chy57589893) 发表:

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刚接触液质测定血样，遇到了很多问题；
    采用正离子模式检测；1）空白干扰：用的是液液萃取，已排除是氮气吹干问题；流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰，更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善，直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号，但是因管路可能有点脏，不能说明问题；请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗？
    2）低浓度不成线性：低浓度响应值都差不多，除了操作问题，有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗？
    3）响应值不稳定：同一份样品，隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇，因柱压较高，改成乙腈；试过乙酸-乙酸铵，响应值略降，为方便，直接改成甲酸；感觉不是酸性对其稳定性影响，是可能是质谱条件选择不对吗？应该怎么改善呢？
        焦头烂额中，请大家多多指教！

从你的描述看，出现低浓度不成线性的原因仍然是因为空白干扰造成的，所以还是要解决空白干扰的问题，甲醇进样有信号，说明有污染，先好好洗下离子源，还有就是离子传输毛细管也要拆下来洗下，因为从你的第三问题看，好像是随着你的进样信号逐渐在下降，这应该不是质谱条件的问题，我感觉像是流动相或者是样品的原因，我觉得你应该考虑下流动相的盐浓度改变和样品前处理的改进（液液萃取的效果是不太理想的，会有较多基质和杂质对测定造成干扰的，考虑SPE吧）

你好，问题的确是如您所说的，我将乙腈改为甲醇-乙酸-乙酸铵缓冲液后，响应值比较稳定（虽有一定上升的趋势，但RSD基本可以接受）；但问题又出来了：空白干扰时有时无，我低浓度的点（甚至中浓度的点）时有莫名的异常高值（甚至和高浓度一致，如1ng和100ng差不多），觉得非常费解，按理说如果是污染的话，响应值不应该那么大；已排除是流动相、处理中溶剂的干扰（因一次处理过程中，“干扰”或“污染”时有时无）；初步怀疑是基质问题：我查了一下，磷脂碎裂的离子对184左右，而我的药物最后的子离子为184，初步怀疑是内源性物质干扰。但是觉得很奇怪的是，我既然用的是MRM选择离子对模式，不应该会出现这种干扰！

目前想尝试改变前处理方法，本来用的是乙酸乙酯，想换换别的萃取液，请问有什么好的建议可以供我借鉴一下吗？

就像我前面说的还是优化前处理方法，固相萃取可以去除许多的干扰，另外对质谱的污染也小

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刚接触液质测定血样，遇到了很多问题；
    采用正离子模式检测；1）空白干扰：用的是液液萃取，已排除是氮气吹干问题；流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰，更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善，直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号，但是因管路可能有点脏，不能说明问题；请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗？
    2）低浓度不成线性：低浓度响应值都差不多，除了操作问题，有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗？
    3）响应值不稳定：同一份样品，隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇，因柱压较高，改成乙腈；试过乙酸-乙酸铵，响应值略降，为方便，直接改成甲酸；感觉不是酸性对其稳定性影响，是可能是质谱条件选择不对吗？应该怎么改善呢？

        焦头烂额中，请大家多多指教！

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刚接触液质测定血样，遇到了很多问题；
    采用正离子模式检测；1）空白干扰：用的是液液萃取，已排除是氮气吹干问题；流动相、空白血浆、水样代替血浆的空白均有干扰，更换各种溶剂、进样瓶后仍无改善，直接用甲醇打质谱的时候在药物浓度的确有点信号，但是因管路可能有点脏，不能说明问题；请问还有其他可能污染的问题或者仪器可能有问题吗？
    2）低浓度不成线性：低浓度响应值都差不多，除了操作问题，有可能是仪器质谱参数选择不当的影响吗？
    3）响应值不稳定：同一份样品，隔十来针后样品响应值下降一半多。色谱条件文献报导是用乙酸-乙酸铵和甲醇，因柱压较高，改成乙腈；试过乙酸-乙酸铵，响应值略降，为方便，直接改成甲酸；感觉不是酸性对其稳定性影响，是可能是质谱条件选择不对吗？应该怎么改善呢？
        焦头烂额中，请大家多多指教！

从你的描述看，出现低浓度不成线性的原因仍然是因为空白干扰造成的，所以还是要解决空白干扰的问题，甲醇进样有信号，说明有污染，先好好洗下离子源，还有就是离子传输毛细管也要拆下来洗下，因为从你的第三问题看，好像是随着你的进样信号逐渐在下降，这应该不是质谱条件的问题，我感觉像是流动相或者是样品的原因，我觉得你应该考虑下流动相的盐浓度改变和样品前处理的改进（液液萃取的效果是不太理想的，会有较多基质和杂质对测定造成干扰的，考虑SPE吧）

你好，问题的确是如您所说的，我将乙腈改为甲醇-乙酸-乙酸铵缓冲液后，响应值比较稳定（虽有一定上升的趋势，但RSD基本可以接受）；但问题又出来了：空白干扰时有时无，我低浓度的点（甚至中浓度的点）时有莫名的异常高值（甚至和高浓度一致，如1ng和100ng差不多），觉得非常费解，按理说如果是污染的话，响应值不应该那么大；已排除是流动相、处理中溶剂的干扰（因一次处理过程中，“干扰”或“污染”时有时无）；初步怀疑是基质问题：我查了一下，磷脂碎裂的离子对184左右，而我的药物最后的子离子为184，初步怀疑是内源性物质干扰。但是觉得很奇怪的是，我既然用的是MRM选择离子对模式，不应该会出现这种干扰！

目前想尝试改变前处理方法，本来用的是乙酸乙酯，想换换别的萃取液，请问有什么好的建议可以供我借鉴一下吗？

就像我前面说的还是优化前处理方法，固相萃取可以去除许多的干扰，另外对质谱的污染也小

版主，固相萃取会不会重现性不好。而且我看处理步骤非常麻烦。我的药物是大环内酯类药物，极性小，分子量914.固相萃取柱选择什么合适？