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主题：【已应助】请问前处理没有乳化，最后定容乳化是什么原因导致的？

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ruby-sunflower
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发表于：2012/05/13 16:20:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
刚做沙星，采用鸡肉样品，无水硫酸钠脱水，用的1%甲酸乙腈提取两次，N2吹干，加0.1%甲酸水：乙腈90:10定容，10000转离心后分三层，上层正己烷，中间乳白色不明物，下层澄清。为什么前面提取未乳化，后面定容乳化了呢？怎么解决？
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2012/5/13 19:13:52 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
乙腈有沉淀蛋白的作用，楼主提取后木有使用正己烷净化？
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netsking
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2012/5/14 6:18:58 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是的. 不过不知道LZ的环己烷从哪儿来的?
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ruby-sunflower
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2012/5/14 7:40:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不好意思没讲清楚，定容的同时加乙腈饱和正己烷净化的，所以上层是正己烷层。
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Charles911
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2012/5/14 11:50:12 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ruby-sunflower(ruby-sunflower) 发表:
不好意思没讲清楚，定容的同时加乙腈饱和正己烷净化的，所以上层是正己烷层。


从头到尾理清楚一下您的定溶液，前面是甲酸乙腈水
后面又变成了乙腈饱和正己烷
到底是什么呢？？

别人不好给您解答啊？

呵呵呵

一个是可能还存在水、蛋白
另外一个就是乙腈和正己烷在别的溶剂存在的时候，就会分层了
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2012/5/14 17:05:13 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
中间乳白色不明物应该是蛋白物质吧
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ruby-sunflower
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2012/7/12 10:17:11 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做的跟楼主的一样。也是出现这种现象。我做过实验一共有两次成功的。不过进样品后回收不太理想。第一次是改变定溶液为2%的甲酸水乙腈90:10，第二次是就用纯乙腈提取一次。吹干。你可以做做看看。我做的第一次是酸度有点大。第二次是回收不太好。能达到50
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happy爱米粒
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2012/7/15 18:59:22 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 netsking(netsking) 发表:
是的. 不过不知道LZ的环己烷从哪儿来的?


应该是定容后加入净化的正己烷
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happy爱米粒
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2012/7/15 19:01:15 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ruby-sunflower(ruby-sunflower) 发表:
我做的跟楼主的一样。也是出现这种现象。我做过实验一共有两次成功的。不过进样品后回收不太理想。第一次是改变定溶液为2%的甲酸水乙腈90:10，第二次是就用纯乙腈提取一次。吹干。你可以做做看看。我做的第一次是酸度有点大。第二次是回收不太好。能达到50


两位不是同一个人？ID都一样的
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雾非雾
mcds
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2012/7/15 19:57:26 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ruby-sunflower(ruby-sunflower) 发表:
刚做沙星，采用鸡肉样品，无水硫酸钠脱水，用的1%甲酸乙腈提取两次，N2吹干，加0.1%甲酸水：乙腈90:10定容，10000转离心后分三层，上层正己烷，中间乳白色不明物，下层澄清。为什么前面提取未乳化，后面定容乳化了呢？怎么解决？


乳化物能溶于乙腈，但不溶于乙腈水，上层是正己烷应该能把油除去，乳化物是可溶性蛋白？
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semibeauty
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2012/7/16 11:20:34 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是蛋白质。。。做瘦肉精时，中间高氯酸那一步省略的话最后液液萃取后中间也有一层乳化层，离心后变为一薄层
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