色谱柱问题:主要由于色谱柱柱效下降等引起,维护色谱柱或者更换 流动相:流动相未起到抑制拖尾或者前沿的作用,应添加适当缓冲剂如三乙胺、醋酸等。 一般拖尾比较厉害的是生物碱类成分的检测, 3.一般拖尾比较厉害的是生物碱类成分的检测,你对此类物质防止拖尾有什么好的建议吗? 一般拖尾比较厉害的是生物碱类成分的检测 你对此类物质防止拖尾有什么好的建议吗? 对于生物碱类,应该选用封端了的色谱柱,减少硅羟基的作用,还有就是调节流动相的 PH 值来避免拖尾 对于生物碱类成分的分离关键在于加入的酸的量,因为你得让成分被色谱柱吸附后,能够很好的溶解在流动相中,即 解吸附下来才行啊,所以注意你的酸的加入量吧!还有就是选择合适的色谱柱,最重要喽! 分离碱性物质,易产生拖尾,一般我们都是在流动相中加点三乙胺(即碱性物质). 生物碱类
液相色谱一般都会在流动相里加入少量碱(二乙胺或氨水等) ,使流动相的 PH 偏碱性。不过用普通的 C18 柱来分析可能进不了几针柱效就不行了,考虑使用宽 PH 范围的 C18 柱。 关于生物碱薄层问题,可以对于薄层板的话可以用 10%NaOH+CMC-Na 溶液进行铺板,还可以适当调节展开剂 PH 值 来防治生物碱拖尾。 应该加三乙胺吧,及三氟乙酸等调节 PH 值,使用氨基的色谱柱啊,不管怎么说首先考虑的是色谱柱的选择。 进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决? 4.用 HPLC 进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决? 用 关于漂移问题: ① 温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定 ② 流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 ③ 柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题 ① 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定 ② 泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。 ③ 流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合 5.
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?
液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么 ① 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。 ② 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子 ③ 可能柱超载,减少进样量。 6.HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 ① 样品量不足,解决办法为增加样品量 ② 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 ③ 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器 ④ 检测器衰减太多。调整衰减即可。 ⑤ 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数 ⑥ 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。 ⑦ 检测池中有气泡。解决办法为排气。 ⑧ 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。 ⑨ 流动相流量不合适。调整流速即可。 ⑩ 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。 7.做 HPLC 分析时,柱压不稳定,原因何在?如何解决? 分析时,柱压不稳定,原因何在?如何解决? 做 ① 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; ② 比例阀失效,更换比例阀即可; ③ 泵密封垫损坏,更换密封垫即可; ④ 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; ⑤ 系统检漏,找出漏点,密封即可; ⑥ 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。 8.我最近更换了另一种牌号的 ODS 柱,虽然分离情况仍可以,但保留时间不能重现,为什么? 我最近更换了另一种牌号的 虽然分离情况仍可以,但保留时间不能重现,为什么? 这是因为被分析物可能具有形成氢键的能力。 尽管过去几年来, 填料的制造技术有了极大的提高, 但不同的厂商的 ODS 填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此,同一被分析物中的各组分在不同牌号 的 ODS 柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物,如三乙基胺(TEA) ,将会使硅醇基的成键能 力饱和,从而能保证不同牌号柱子上的相对保留时间具有较好的重现性。 如分离情况可以,系统稳定,达到系统适用性要求,就不必保留时间的重现。 9.我购买的 HPLC 柱验收测试时柱压过高,请问为什么? 柱验收测试时柱压过高,请问为什么? 我购买的 柱压过高是 HPLC 柱用户最常碰到的问题。