主题:【求助】未知红色色素的检测方法

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geebzbz
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大家好,最近又遇到一问题,请大家指导:
我准备从菌体中分离一种红色色素,目前利用乙酸乙酯萃取出来,可通过硅胶柱层析等来分离(正己烷和乙酸乙酯的混合比例可以较好洗脱),因为肉眼可观察到红色;
但是,如果想通过仪器来稍微定量一下,该怎么操作?也就是说,如何通过仪器来检测该红色色素
谢谢大家的回复!
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geebzbz
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没回复啊,是否发错地方了?期待解决办法中。。。
fengmo4668
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你准备用什么仪器来定量呢?
先去确定结构吧,
如果结构确定为已知化合物并且有对照品市售,那么恭喜你,你可以有很多方法来定量;
如果确定为未发现化合物,那么恭喜你,你发现了一个新化合物。同时向你默哀,因为你接下来会有非常繁重的工作量等着你。这时,定量的问题,先放放再说吧。
geebzbz
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你准备用什么仪器来定量呢?
先去确定结构吧,
如果结构确定为已知化合物并且有对照品市售,那么恭喜你,你可以有很多方法来定量;
如果确定为未发现化合物,那么恭喜你,你发现了一个新化合物。同时向你默哀,因为你接下来会有非常繁重的工作量等着你。这时,定量的问题,先放放再说吧。

可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?
fengmo4668
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可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?


我说一下我的理解:
你是想用一个简单的办法,来分辨该如何收集过柱子流下的液体?
geebzbz
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可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?


我说一下我的理解:
你是想用一个简单的办法,来分辨该如何收集过柱子流下的液体?


是的,主要就是这个目的,想通过仪器来检测,尤其是如果想利用HPLC之类的分离方法时,如何设定检测波长?谢谢回复啦!
fengmo4668
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可能是我没说清楚,我说的定量主要是用来在分离这个色素时,检测用的,因为不知道怎么检测,比如用光谱的话,怎么确定这个选择的波长呢?


我说一下我的理解:
你是想用一个简单的办法,来分辨该如何收集过柱子流下的液体?


是的,主要就是这个目的,想通过仪器来检测,尤其是如果想利用HPLC之类的分离方法时,如何设定检测波长?谢谢回复啦!


最简单、最省时的办法就是TLC。

找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。
geebzbz
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最简单、最省时的办法就是TLC。

找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。

目前,我也是准备用TLC来检测,合并组分;只是在想,对于这种未知的色素(或者扩大到未知的天然化合物),分离检测过程中,其波长通常都怎么确定下来的,因为是在分离过程话,其实是个混合物啊,这样波长怎么设定呢?
fengmo4668
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最简单、最省时的办法就是TLC。

找到成分比较单一的洗脱液后,再去做紫外扫描,就可以确定检测波长了。

其实,如果只是想简单的归类合并洗脱液,TLC已经足够了。没必要做HPLC。当然,如果你还有别的检测目的的时候,可以多考虑别的仪器。但是前提还是要找到成分单一的洗脱液。


目前,我也是准备用TLC来检测,合并组分;只是在想,对于这种未知的色素(或者扩大到未知的天然化合物),分离检测过程中,其波长通常都怎么确定下来的,因为是在分离过程话,其实是个混合物啊,这样波长怎么设定呢?

讲洗脱液多分几段,找纯物质的一段去做紫外吸收。
如果浓度太低的话,可以考虑浓缩。
浓缩时要不要特别保护,怎样保护,只能自己摸情况了。
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