主题:【原创】【极限体验】记一次维生素D原料的入厂检验

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fengmo4668
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【背景】
最近购置了一批原料用于生产,大部分是维生素类的。
实验室内部按照各品种的检验规定,对检验内容进行了分工。
因为我做液相比较多,所以,分到我手里的,都是液相的检验项目。
其中,就含有以下内容中要提到的维生素D3


【色谱条件】

仪器型号:Agilent 1260;检测器:DAD检测器;色谱柱:TopsulTM(拓谱)Silica Si 4.6*250mm 5μm流动相:正己烷-正戊醇(997:3);检测波长:254nm,流速:2ml/min
基本上严格按照2010年版《中国药典》二部附录 K中维生素D测定法中第一法来做。(可能有版友会问到,什么叫基本上严格按照….来做
,答案就在文中。)

【实验过程】

首先按照药典中的规定,配制系统适用性供试液。通过高温和光照,对维生素D3对照品进行破坏,得到前维生素D3峰、反式维生素D3峰,速甾醇D3峰。
药典中规定的方法是:量取对照品贮备液5ml,置具塞玻璃容器中,通氮后密塞,置90水浴中加热1小时,取出,迅速冷却,加正己烷5ml,摇匀,置1cm具塞石英吸收池中,在28W主波长分别为254nm365nm的紫外光灯下,将石英吸收池斜放成45°,并距灯管5~6cm,照射5分钟,使溶液中含有前维生素D3、反式维生素D3、维生素D3及速甾醇D3
但是完全按照药典的方法,得到的前维生素D3及速甾醇D3非常小。放大了看,前维生素D3还能认为是一个峰,而速甾醇D3连认为是一个峰都很勉勉强强。
没办法,只能延长高温和光照的时间来达到目的(图1即为得到的图谱)。分离度什么的都能达到要求,分别为3.6381.98114.7672.638

1
系统适用性图谱

做好了系统性适用性,剩下的有关物质和含量全部迎刃而解。上传图谱大家鉴赏一下吧。


2. 有关物质图谱

3.
含量图谱

【结果】

顺利完成检验任务!

【结论】

月旭的色谱柱,性能没的说,一个词,杠杠的!
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【讨论】

1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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2012/6/29 18:43:04 Last edit by fengmo4668
yuduoling
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一般都是按药典来进行前处理的


如果药典方法不符合实验实际情况,是不是要改进呢?
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小卢
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1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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1.只要结果符合要求,过程应该没问题的
2.多的峰有可能是你说的结果。
但是否符合要求我也不是很懂,早些年做过usp或ep标准的系统适用性,只要满足其方法固定的峰要求,其他的都可以不用去管,不知道现在还是不是这样。

另外,多等等大家来讨论,人多点加精华,大家都来蹭点“经验”!呵呵
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1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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1.只要结果符合要求,过程应该没问题的
2.多的峰有可能是你说的结果。
但是否符合要求我也不是很懂,早些年做过usp或ep标准的系统适用性,只要满足其方法固定的峰要求,其他的都可以不用去管,不知道现在还是不是这样。

另外,多等等大家来讨论,人多点加精华,大家都来蹭点“经验”!呵呵


我出这样的结果,其实是认同于这样的做法的。

至于是不是真的合适,有待于大家的讨论吧。
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1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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1.只要结果符合要求,过程应该没问题的
2.多的峰有可能是你说的结果。
但是否符合要求我也不是很懂,早些年做过usp或ep标准的系统适用性,只要满足其方法固定的峰要求,其他的都可以不用去管,不知道现在还是不是这样。

另外,多等等大家来讨论,人多点加精华,大家都来蹭点“经验”!呵呵


人多点加精华,蹭的不是经验,因为经验不值钱,哈哈,大家想要的是声望吧。至少我是。
arvid2007
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1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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1.只要结果符合要求,过程应该没问题的
2.多的峰有可能是你说的结果。
但是否符合要求我也不是很懂,早些年做过usp或ep标准的系统适用性,只要满足其方法固定的峰要求,其他的都可以不用去管,不知道现在还是不是这样。

另外,多等等大家来讨论,人多点加精华,大家都来蹭点“经验”!呵呵


我出这样的结果,其实是认同于这样的做法的。

至于是不是真的合适,有待于大家的讨论吧。

那你充氮保护一下,看这个峰还有没出来
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一般都是按药典来进行前处理的


如果药典方法不符合实验实际情况,是不是要改进呢?

个人觉得要改进,毕竟企业要制定适合自己的标准,适当的修改调整是必需的
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1.      系统适用性的前处理方法,没有完全按照药典上的规定,你认为合适吗?

2.        经过改进处理后的系统适用性样品,比药典上规定的多了一个峰(约在12.236min
处),为什么会多一个峰呢?我的分析为可能为第二次破坏时氧化出来的产物(因为我忘了充氮了)。多了一个峰,能说明问题吗?



   
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1.只要结果符合要求,过程应该没问题的
2.多的峰有可能是你说的结果。
但是否符合要求我也不是很懂,早些年做过usp或ep标准的系统适用性,只要满足其方法固定的峰要求,其他的都可以不用去管,不知道现在还是不是这样。

另外,多等等大家来讨论,人多点加精华,大家都来蹭点“经验”!呵呵


我出这样的结果,其实是认同于这样的做法的。

至于是不是真的合适,有待于大家的讨论吧。

那你充氮保护一下,看这个峰还有没出来


样品和有关物质里面都没有那个峰。
只能是氧化产物。
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一般都是按药典来进行前处理的


如果药典方法不符合实验实际情况,是不是要改进呢?

个人觉得要改进,毕竟企业要制定适合自己的标准,适当的修改调整是必需的


一般来讲,方法改进的时候,是要做方法学研究的。

但是,针对于我们的这个情况,我觉得没有必要。不知能否说的过去。
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