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液相色谱（LC）

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主题：【求助】需要加预保护柱吗？

浏览0 回复5 电梯直达

kzhchg2006

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发表于：2012/06/29 18:00:45 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我正在测一个九肽的稳定性，想检测其酶解情况;具体方法是将其放在血浆中，在不同的时间段来用乙腈终止其反应，静止20min,离心15000rmp,20min取其上清液，进HPLC,我选的柱子是安捷伦 USKH009672,300A的，但是有人建议我之前应该加个保护柱，以防血浆中的没有清除杂质蛋白质堵塞柱子，甚至导致柱子不能用了，有这么严重么？？我参考相关的文献，都没有提到保护柱的问题，是不是一般的不用写出来呀？自己犹豫要不要加？？好纠结！！大家说要不要呀！！如果我要选，选哪种的适合的呢?

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2012/6/29 21:54:39 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

保护柱一般不写的，保护柱换得频繁的话也吃不消。尽量净化样品吧。

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有水有渝

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2012/6/30 9:00:14 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

保护柱只是设备维护性质，保护色谱柱的使用寿命，就像文献中不会跟你说仪器要配置泵的在线清洗装置一下。

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houjjun

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2012/6/30 12:44:59 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

保护柱一般不写，它只是设备维护性质，保护色谱柱的使用寿命的一个部件。
加保护柱的必要性：保护柱要叫预柱，它相对色谱柱比较便宜，样品或流动相有脏东西及一些很难冲出色谱柱的物质时间长会堵塞或污染色谱柱，影响色谱柱的柱效及寿命，加上它起保护作用色谱柱作用；
加保护柱的缺陷：1.保护柱处理样品中杂质、污染物能力较色谱柱差一些（因为它体积小），所以保护柱的寿命短，需要经常换，比较麻烦；
2.加保护柱时，尤其是保护柱有些污染时，柱压会很高，流速不稳定，有时会致使仪器出现漏液等故障；另外他可能会出现峰拖尾，怪峰鬼峰等现象，影响分析。
加保护柱有利有弊，要量力而行。
保护柱就是起过滤净化流动相、样品，保护色谱柱，如果我们在前处理环节使流动相、样品足够干净或尽可能干净，加保护柱的必要性就没那么大。尽量净化样品吧。

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