主题:【求助】液相色谱测饲料中维生素B1出峰时间

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liran1002
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用高效液相色谱测维生素B1时 用高250mm的柱子多长时间出峰啊 走了40分钟还不出峰(国标上用的是长150mm柱子) 求专家解惑
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秋醉虞阳
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看你流动相和组分的。
流动相:缓冲液[取庚烷磺酸钠0.25g,用磷酸钠溶液(取磷酸钠38g,加水至1OOOml使溶解,用磷酸调pH值至2.1)溶解并稀释成1OOOml]-乙腈(94:6)
流    速:1.0ml/min
检测波长:210nm
柱    温:室温
进样量:20μl
色 谱 柱:ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
上述情况5分钟左右就能出峰了。是否你的浓度不够或者柱子不适合。
蓝人
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基线是什么样的

传个图看看

还有有没有没采集上

通道错了


等原因
liran1002
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原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
看你流动相和组分的。
流动相:缓冲液[取庚烷磺酸钠0.25g,用磷酸钠溶液(取磷酸钠38g,加水至1OOOml使溶解,用磷酸调pH值至2.1)溶解并稀释成1OOOml]-乙腈(94:6)
流    速:1.0ml/min
检测波长:210nm
柱    温:室温
进样量:20μl
色 谱 柱:ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
上述情况5分钟左右就能出峰了。是否你的浓度不够或者柱子不适合。

我用的流动相是:取庚烷磺酸钠1.1g,EDTA0.05g,加水溶解,再加入25ml冰乙酸,5ml三乙胺定容1000ml。取此溶液860ml,加入140ml甲醇。
流    速:0.8ml/min
检测波长:460nm
柱    温:30
进样量:10μl
色 谱 柱:ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
估计是样品中含量太少了哈哈...提高含量后在36min是出峰啦
albert
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原文由 liran1002(liran1002) 发表:
原文由 秋醉虞阳(wangjianhua1102) 发表:
看你流动相和组分的。
流动相:缓冲液[取庚烷磺酸钠0.25g,用磷酸钠溶液(取磷酸钠38g,加水至1OOOml使溶解,用磷酸调pH值至2.1)溶解并稀释成1OOOml]-乙腈(94:6)
流    速:1.0ml/min
检测波长:210nm
柱    温:室温
进样量:20μl
色 谱 柱:ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
上述情况5分钟左右就能出峰了。是否你的浓度不够或者柱子不适合。

我用的流动相是:取庚烷磺酸钠1.1g,EDTA0.05g,加水溶解,再加入25ml冰乙酸,5ml三乙胺定容1000ml。取此溶液860ml,加入140ml甲醇。
流    速:0.8ml/min
检测波长:460nm
柱    温:30
进样量:10μl
色 谱 柱:ODS C18 250mm * 4.6mm * 5.0μm( 长度*内径*颗粒大小 )
估计是样品中含量太少了哈哈...提高含量后在36min是出峰啦

我也是这么做的,但是可惜的是,我就没看到峰出在什么地方
valorb
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liran1002
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[我也是这么做的,但是可惜的是,我就没看到峰出在什么地方
呵呵,是吗 我是用禽用多维做的,含量还少多一些
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