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主题：【原创】【全民抗日,国货当自强】月旭SEC柱有奖竞答终结题

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samanthalas
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发表于：2012/09/28 13:54:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
    随着终结题的发布, 我们的SEC色谱柱新品推广活动即将结束。可是中日关于钓鱼岛主权问题的对峙，会有终结吗？

终结题：
1、月旭SEC色谱柱的pH适用范围是2-7.5。为何这样规定呢？请分别说明在流动相低于2，以及高于7.5的情况下，填料会发生什么情况。

2、月旭SEC色谱柱主要靠体积排阻原理以及亲水作用原理进行分离目标物。目前已有120A，300A，500A，1000A几种孔径，哪种或哪些更侧重体积排阻原理？

3、Ultimate® SEC 120 Å小孔径色谱柱为什么更适合分离头孢类等极性目标物；300 Å适合分离蛋白、多肽等生物大分子?

以上题目均出自第8题，版友们出的题目中。由于时间关系，当时这些很好的问题，未能得到回答，而出题者本人也不见得知道答案。就在终结题中，一起拿出来与大家探讨吧！

本题一共三个小题，共发出3颗红心！
每个小题，第一个回答正确者，得到一颗红心！

答案：

1：pH不超过7.5的原因是考虑到这款柱子仍然是硅胶基质的，虽然表面包覆了一层聚合物，但是最好不要在过碱的环境中使用；pH不要小于2的原因是：由于其硅胶表面键合了二醇基，这样在过酸的条件下键合相会脱落，类似于C18烷基链；

2:120A的是常规的分析柱孔径，由于其表面键合了高分子聚合物，根据相似相溶原理，他们与亲水性的目标物具有极性作用、偶极、氢键等作用力，因而不是单纯的体积排阻作用力；而300A，500A,1000A由于孔径更大，因而对于蛋白、多肽、酶等生物样品的保留就倾向于体积排阻的原理，硅胶表面包覆的聚合物提供一个极为亲水的环境，保证了目标物能更好地在硅胶的孔结构内被保留；

3：此题跟第二题的答案类似，头孢类等极性目标物的分子量相对于蛋白等大分子来说很小；120A的填料对他们的保留不仅仅是体积排阻作用，因为目标物能通过体积排阻，hilic多种模式而得以较好的分离；而蛋白等生物样品属于大分子，他们在120A孔径的填料区分度就很小，这样无论是从峰型还是分离效果都不如孔径更大的填料，因而300A 的填料更适合用于分离蛋白等生物大分子，而此时头孢类的分子量较小，在300A的填料走的路程没有区别，因为分离效果不够。



版主评论：第一题9楼版友最先回答正确，获得一颗；

                  第三题12,13楼版友回答最全面，获得一颗；

                  第二题28楼版友回答正确，获得一颗；

35楼版友回答太精彩了，虽然结果有点点小问题，但是解释的很有水准，版主决定再给他半颗！
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yu3226033
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2012/9/28 13:55:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
300A孔径，更侧重体积排阻原理.排阻色谱分离的基础是不同分子大小的组分进人填料内孔深度的不同。因此，选择和搭配具有不同孔径，色谱性能良好的填料是很重要的，填料孔径大小应与试样分子量的大小相适应。排阻色谱主要被用与分离大分子物质，其分离范围从相对分子质量2000～2000000之间,300A，5000-1250000
pH值不可超过2-7.5这一范围,当pH>8时,硅胶会释出
生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。
当在流动相缓冲液中加入和水混溶的有机溶剂时,其中的盐类溶解度下降,可析出盐类沉淀,堵塞柱子;加入粘度不同的样品溶液也可能发生类似现象。所以缓冲液中盐的浓度宜低,样品提取液的组成应和流动相匹配。
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2012/9/28 15:15:09 Last edit by yu3226033
冷冷的冰雨
xy4585618
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2012/9/28 13:59:11 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、月旭SEC色谱柱的pH适用范围是2-7.5。为何这样规定呢？防止填料发生反应

请分别说明在流动相低于2，以及高于7.5的情况下，填料会发生什么情况。填料被破坏，柱子塌陷


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东风恶
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2012/9/28 14:00:46 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
抢个沙发！
原来是个板凳啊！
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2012/9/28 14:01:43 Last edit by luoleqc
samanthalas
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2012/9/28 14:01:23 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 冷冷的冰雨(xy4585618) 发表:
1、月旭SEC色谱柱的pH适用范围是2-7.5。为何这样规定呢？防止填料发生反应

请分别说明在流动相低于2，以及高于7.5的情况下，填料会发生什么情况。填料被破坏，柱子塌陷



为什么填料会被破坏呢？
怎么破坏的？
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dahua1981
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2012/9/28 14:02:16 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
抢个沙发！
原来是个板凳啊！
板凳也没了
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冷冷的冰雨
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2012/9/28 14:03:26 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3、Ultimate® SEC 120 Å小孔径色谱柱为什么更适合分离头孢类等极性目标物；300 Å适合分离蛋白、多肽等生物大分子?

这应该和分子量有关
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yu3226033
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2012/9/28 14:03:48 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3、Ultimate® SEC 120 Å小孔径色谱柱为什么更适合分离头孢类等极性目标物；300 Å适合分离蛋白、多肽等生物大分子?

Ultimate SEC色谱柱使得目标物能够保持较好的活性由于依据的是体积排阻的原理，填料的大孔结构保证了大分子具有较好的分离效果，这样在分离分析生物大分子范围更广，分离性能也更强；

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2012/9/28 14:05:50 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
3、Ultimate® SEC 120 Å小孔径色谱柱为什么更适合分离头孢类等极性目标物；300 Å适合分离蛋白、多肽等生物大分子?

现有的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。

Ultimate® SEC填料采用独特的化学键合技术，在硅球表面键合了亲水性聚合物以及亲水性二醇基官能团。双重键合机制使水溶性高分子聚合物、蛋白、生物酶、多肽等生物样品的非特异性吸附极小；因而可广泛应用于水溶性聚合物及生物大分子的分离和测定。
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2012/9/28 14:31:35 Last edit by yu3226033
冷冷的冰雨
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2012/9/28 14:10:25 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
原文由 冷冷的冰雨(xy4585618) 发表:
1、月旭SEC色谱柱的pH适用范围是2-7.5。为何这样规定呢？防止填料发生反应

请分别说明在流动相低于2，以及高于7.5的情况下，填料会发生什么情况。填料被破坏，柱子塌陷



为什么填料会被破坏呢？
怎么破坏的？

低2，则键合相会发生水解，消失
超过7.5，则硅胶会溶解，进而赌赛柱子
该帖子作者被版主 samanthalas加 10积分， 2经验，加分理由：第一个回答正确！加一颗红心！
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samanthalas
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2012/9/28 14:22:16 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
本题一共三个小题，共发出3颗红心！
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