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液相色谱（LC）

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主题：【求助】C18柱分离天冬氨酸

浏览0 回复5 电梯直达

jennyfu311

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发表于：2012/11/08 11:40:39 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

大家好！我们实验室正试着用C18柱分离天冬氨酸（其紫外最大吸收处是波长230nm）我们的柱长型4.6*150mm,紫外检测器，流动相是90:10水和乙腈，做不出东东来。请问各位高手，有没有什么好办法

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2012/11/8 11:49:39 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果方法不成熟，最好用梯度洗脱，确保样品中所有组分都洗脱下来。

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ins0mnia2010

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2012/11/8 13:01:46 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

极性强，难分离，摩尔吸收系数也不高，换了流动相也没用，做氨基酸都用GC或者氨基酸分析仪做

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maqingtie

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2012/11/8 13:44:10 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

没有紫外吸收，当然没峰了。浓度放大。低波长200nm试试看

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houjjun

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2012/11/8 23:42:50 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用荧光检测器，或衍生法

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2012/11/8 23:43:52 Last edit by houjjun

三人行

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2012/11/9 22:34:19 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

１．１仪器高效液相色谱仪（Ａｌｌｔｅｃｈ）：包括４２６ＨＰＬＣ泵，蒸发光散射（ＥＬＳＤ）２０００检测器等；ＴＧＬ－１６Ｇ冷冻离心机；电子天平；ＬＧ冰箱。
１．２试剂乙腈：色谱纯，ＣａｌｅｄｏｎＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ公司；Ｌ－天冬氨酸：Ｓｉｇｍａ公司；三氟乙酸：ＡＲ，国药集团化学试剂有限公司；七氟丁酸：ＡＲ，Ｆｌｕｋａ公司；所用水：Ｍｉｌｌｉ－Ｑ纯水机制备。
１．３色谱条件色谱柱：ＡｌｌｔｅｃｈＰｒｅｖａｉｌＣ１８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：０．１４％三氟乙酸（含０．０６％七氟丁酸）溶液－乙腈溶液（８０∶２０）；流速０．９ｍＬ／ｍｉｎ；。检测器：ＥＬＳＤ２０００Ａｌｌｔｅｃｈ；ＥＬＳＤ参数：漂流管温度１１０℃，载气（氮气）流速２．６Ｌ／ｍｉｎ；进样量２０μＬ；柱温２５℃

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