主题：【分享】NY761-2008的使用和注意事项

例行监测工作中蔬菜农药残留检测常见问题和解决办法
2008年5月26日
前  言
    连续几年来,在检验工作中一直使用NY/T 761-2004方法进行蔬菜水果农药残留检测,利用这一方法我们检测了大量的样品,也做过无数次添加回收试验。下面，就自己在农药残留检测中遇到的问题和摸索到的一些经验与大家进行共同分享。

几  个  问  题
NY/T 761-2004方法的特点
样品提取方法
样品仪器检测
难检组分

NY/T 761-2004方法的特点

优点：与GB 5009.20和德国S19方法相比，该方法明显简便，步骤少，操作简单，显著缩短了前处理的时间，明显提高农药残留检测效率。
缺点：“双刃剑”  其优点也正体现了不足之处，由于前处理过程简单，样品没有经过充分的净化，尤其是有机磷检测,分取吹干后直接定容上机检测,容易污染衬管，给仪器维护提出了更高的要求。

样品的提取方式
样品的提取方式：NY/T 761-2004中提取方式是匀浆，我们对同一样品同时采用匀浆、振荡和超声方法三种不同提取方法进行了添加回收试验（试样为辣椒、甘蓝、黄瓜、白菜等，添加浓度为0.1），结果表明不同的提取方法回收率结果没有显著差异。结果见下页表1。
样品的提取方法回收率
不同提取方法用时比较
不同提取方法实际样品测定结果（辣椒）
样品仪器检测
      利用气相色谱仪或气-质联用仪进行测时,优化仪器条件，将仪器调整到一个比较理想的状态非常关键,尤其是有机磷类样品的检测。因此,仪器维护是检测过程中一个重要环节,下面从以下几个方面进行逐一说明.
有机磷类农药操作条件与谱图
菊酯类农药操作条件与谱图
仪器维护的几点注意事项
气源
进样器和进样针
衬管
色谱柱
检测器
气  源
  气源:载气（氮气）、燃烧气（氢气、空气）
如用钢瓶，一般要选择纯度达99.999%
如用气源发生器要经常检查、更换干燥剂，注意气源与仪器接口处是否有积水现象。
最好配备气体过滤器，避免鬼峰。
进样器和进样针
            不同仪器配备自动进样器和进样针有所不同，但其质量对保证进样准确性是很关键的。
要定期清洁并检查进样器是否灵活，以减少不必要的麻烦（如积尘太多造成停止运行或者进样不重复性等）。
进样针可以选用两种不同的溶剂进行清洗；在进样后增加清洗次数；时间长了可取下用丙酮浸泡清洗进样针尾部等等。
所有这些细节性工作最好都要事前进行，以避免在进样过程中出现问题。
衬  管
        玻璃衬管对残留分析非常关键，有机磷农药甲胺磷、氧化乐果、乐果等农药的出峰情况受衬管影响非常大。
最好选经惰性处理的衬管，不同厂家、不同批次衬管质量差异很大，有些厂家的惰性化处理过的衬管质量甚至不如普通衬管，有些衬管几乎是一次性的。
当标样峰面积有明显下降时要及时清洗衬管，更换玻璃棉，更换后要获得理想的响应值需要用样品进行饱和。
惰性化处理    DMCS处理效果不佳，原因？
刚更换衬管所进标样(db-1701 0.1ppm)
更换衬管饱和后所进标样(db-1701 0.1ppm)
更换衬管后过饱和后所进标样(db-1701 0.1ppm)
衬管更换前后和饱和后所进标样峰面积比较(db17010/0.1ppm)
刚更换衬管所进标样(rtx-5silms0.2ppm)
更换衬管饱和后所进标样(rtx-5silms0.2ppm)
更换衬管后过饱和后所进标样(rtx-5silms0.2ppm)
衬管更换前后和饱和后所进标样峰面积比较(rtx-5sil/0.2ppm)
色  谱  柱
            色谱柱是组分分离的重要部分,色谱柱质量如何直接影响检测结果。衡量柱子好坏不仅看柱效、还要考虑其流失和柱寿命等
不同类型（或不同填料）色谱柱的分离能力和出峰大小不同。DB-1、DB-17，DB-1701、 RTX-5SILMS、RTX-OPP有机磷农药的出峰情况。
同样填料不同生产厂家或不同批次的色谱柱分离能力和出峰大小也有差异。DB-5MS、HP-5MS、RTX-5SILMS在质谱上出峰情况也有所不同。
不同生产厂家或不同批次的色谱柱柱寿命和柱流失也不相同。
DB-1
DB-17
DB-1701(0.1ppm)
RTX-5SILMS(0.2ppm)
RTX-OPP
检  测  器
            不同仪器厂家不同类型检测器各有特点，在仪器维护上需要区别对待。
VARIAN gc  CP 3800：PFPD 需调TICK-TOCK、光电倍增管电压、门开关、门延迟等，富氢环境；ECD需调接触电位、池电流等，而且ECD的检测池易污染，需定期高温过夜进行老化。
岛津gc-2010A: FPD 需调石英管的位置、氢气流量等；ECD需设置背景电流、定期老化检测池等。
难  检  组  分
          指检测过程中添加回收太高或太低或回收率不稳定的一些农药组分。按不同原因可分为四类：
甲胺磷、氧化乐果、乐果
甲拌磷
百菌清
氯氰菊酯
甲胺磷、氧化乐果、乐果
共同特点：极性相对较强，容易被衬管和玻璃棉吸附，一旦衬管脏了，标样峰面积下降特别明显。
甲胺磷一般先出来，响应值比较高，回收率在70%~100%之间，问题不大。
氧化乐果响应值低，氧化乐果和乐果回收率最大的问题是回收率很容易超百，很容易到150%左右。
如用样品加标作为标样来计算，氧化乐果、乐果回收率变好，但甲胺磷回收率会降低。矛盾？
混  标
青椒+混标
混标与青椒+混标峰面积比较
甲拌磷
          在做添加回收率时，甲拌磷的回收率不稳定，有时非常好90%左右，但有时会非常低，低于20%，而甲拌磷标样出峰情况非常稳定，而且甲拌磷这种农药性质也比较稳定，到底为什么？
经过多次试验发现是氮吹环节的问题，如果吹的太干，甲拌磷回收率肯定低，一定要近干，或者用旋转蒸发仪进行浓缩就不会出现这个问题。
百菌清
          百菌清容易出现回收率不稳定情况，回收率偏低，百菌清的回收率不稳定可能与蔬菜品种有关，一般情况下，回收率60~70%，还可以接受，但在甘蓝做添加回收时，经常低于20%，而同时添加的其他组分回收率很好，问题何在？
氯氰菊酯
            氯氰菊酯也存在回收率不稳定情况，但往往回收率偏高，高到160%左右。一般出氯氰菊酯标样出三个峰，但有时样品里氯氰菊酯出四个峰或中间峰变高，肯定是有其它组分干扰，经确认是毒死蜱,多种有机磷农药在ECD上有响应.
QuEChERS方法
Michelangelo Anastassiadas and Steven J. Lehotay发表于AOAC Int.(2003)**期刊和Pittcon 2003.
该方法快速、简单、经济、环保。
样品净化较差

    技术路线
重新回顾NY/T 761-2004方法
称样25克+乙睛50毫升
分配与净化
        NY/T761方法                                                      简化方法

            取有机相10ml                                          取有机相5ml至离心管

          烧杯80℃，氮气吹干

    溶剂溶解转移离心管
    氮气吹干，定容5ml                    氮气吹干，定容2ml
                   
                          过SPE柱

                                氮吹定容上机检测菊酯类农药

                      上机（有机磷类）

是否可以进一步改进这一方法
称样量与提取溶剂量。是否可以称10g样品+40ml 乙腈会更好
提取方法，选择振荡或超声。
氯化钠称3g可能更好，避免氮吹后盐析出。
振荡可用仪器替代人工，减轻劳动
分取滤液是否可以减少，直接吸取到离心管中氮吹定容，避免转移。
过SPE柱净化步骤是否可以进一步优化。
总  结
            如果我们仔细考虑样品前处理步骤和仪器检测方法，其实每一个环节都有许多值得探讨的问题，需要设计许多的实验来验证。
Thanks !