主题:【讨论】LC-MS/MS做方法学考察时LOQ和LOD严谨的做法应该怎样做???

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ixin9
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chaochengxiao
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弱弱的请教一下,
如果按照第二种方法,连续测试含量很低的基质,那么 含不同浓度目标化合物的基质 做出来的 SD值 会不会差别大呢?非常感谢!
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gosome
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这是一个一直困人很多人包括我自己的问题,欢迎大家解答
szy3282
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我的看法不同,以往单质量分析器或分辨率不高的情况下,楼上的方法应该是标准的,但串联的高分辨质谱有时噪音很小(这还要看你基质),用S/N的标准可能会高估仪器的定量范围(即测定的LOQ低于实际能够进行线性相应的阈值)。我觉得用空白基质做标准曲线,能保证CV<5%,且此点作为标准曲线最低点能使得R>0.99才能算做LOQ。LOD倒是可以用SN>3为标准。

欢迎板砖。
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2013/7/30 14:58:18 Last edit by szy3282
leonqshen
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不存在楼主所说的无法重现的问题。
楼主无法重现,推测估计是质谱采集时间没给足,导致每个峰的采集点过少。定量的话一般最好给足13个点每个峰
hujiangtao
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c01818
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您好,我想问一下空白样品浓度很高时怎么办啊?

原文由 johne0212(johne0212) 发表:

LC/MS/MS做S/N比有几种不同的算法,通常我们使用的是下面两种,但是每种算法都是估测值,推荐你计算出来以后在去验证一下。
1.通过S/N去算

首先需要空白基质,然后在空白基质上添加3个尽量接近LoD浓度水平的被分析物。每个浓度水平平行分析2次,计算每次的S/N,然后以添加浓度为横坐标,S/N为纵坐标,进行线性回归,得到方程,当Y=3时计算的X值就是LoD,当Y=10时,X为LoQ。具体例子如下。

LoD & LoQHeightS/N
Spiked 3ppb-165.56
Spiked 3ppb-254.63
Spiked 6ppb-11614.81
Spiked 6ppb-21513.89
Spiked 8ppb-12018.52
Spiked 8ppb-22220.37
Cal Value(ppb)
LoD2.22
LoQ4.64


此做法,噪声的取值时间段有很大的人为干扰因素,所以噪声值人为影响比较厉害。

2. 第二种方法是通过连续测试空白基质或者含量很低的基质(测试次数大于等于6次),计算SD得到,公式为LoD=Mean(Blank)+3 SD, LoQ=Mean (Blank)+10SD。

此做法不仅仅只适用于色谱分析,并且可以应用到任何给定量分析结果的实验,比如ICP-OES,灰分,凯氏定氮和脂肪等测试。
hujiangtao
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计算出一个理论值 然后配置该浓度看看能不能做出来
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