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主题：【求助】微生物大肠菌群

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sunqiaoli8
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发表于：2013/03/11 12:53:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
微生物检测时，大肠杆菌属于什么样的菌，革兰氏染色后呈现什么颜色，注意，我问的是大肠杆菌，不是大肠菌群，还有革兰氏染色的原理是什么？
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2013/4/24 9:25:25 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大肠埃希氏菌(Escherichia coli )通常称为大肠杆菌，1885年由Theodor Escherich发现，分布在自然界，大多数是不致病的，主要附生在人或动物的肠道里，为正常菌群，少数的大肠杆菌具有毒性，可引起疾病
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2013/4/24 9:26:27 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，
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2013/4/24 9:28:14 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
革兰氏染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经蕃红复染后就成红色。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色，呈现蓝紫色
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2013/4/24 9:30:33 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
革兰氏染色法流程
1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。
2、 涂片：
液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。

  革兰氏染色
3、 晾干：让涂片在空气中自然干燥。
4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。
5、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵结晶紫液，染1min。
6、 水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。
8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色，立即水洗。
9、 复染：滴加蕃红复染3-5min，水洗。至此，革兰氏染色结束。
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