主题:【求助】TEM拍照后,照片质量问题求解?!

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水云灵仙
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        大家好,小人新手一枚,刚刚接触透射电镜,用的是JEM-1230,有几个小问题求教各位行家:

    1、低倍下(10,000倍以下)拍照,照片为什么很模糊,细节一点都不清楚,都成一团了,高倍下反而比较清楚,细节比较明显。

    2、调教方法,大家一般都是怎么调焦的呢?

    3、光圈亮度在高倍下会逐渐变暗,假设在10万倍下,光的亮度为10,可以将其调试成为10万倍下,光亮度为20吗?因为总觉得在高倍下,光太暗,不好调焦呢,看不清啊~~    求教有什么办法解决呢??

      以上是出现的几个小问题,求高手赐教!!
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洪星二锅头
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可以将图片传上来给大家看看

低倍调焦一般是利用圆形或方形的孔(微栅比较合适),使得孔的xy方向的条纹相同,且在欠焦与过焦变化不大

光圈亮度?高倍下怎么会看不清呢
水云灵仙
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可以将图片传上来给大家看看

低倍调焦一般是利用圆形或方形的孔(微栅比较合适),使得孔的xy方向的条纹相同,且在欠焦与过焦变化不大

光圈亮度?高倍下怎么会看不清呢


听得不是很明白,“圆形或方形的孔”你指的是铜网么? “孔的xy方向的条纹”从哪里看到呀?

高倍下看不清是指光的亮度已经很小了,都不亮了,还怎么看呢???
水云灵仙
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可以将图片传上来给大家看看

低倍调焦一般是利用圆形或方形的孔(微栅比较合适),使得孔的xy方向的条纹相同,且在欠焦与过焦变化不大

光圈亮度?高倍下怎么会看不清呢


图片没有拷贝下来,下次有了之后再给上传看看啊,希望帮忙分析分析~
水云灵仙
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可以将图片传上来给大家看看

低倍调焦一般是利用圆形或方形的孔(微栅比较合适),使得孔的xy方向的条纹相同,且在欠焦与过焦变化不大

光圈亮度?高倍下怎么会看不清呢


看下这个照片,是植物的叶绿体照片,放大倍数是5000倍,我就是想知道为什么低倍下结构细节为什么显示不出来呢??

洪星二锅头
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没有明白你所说结构细节是指什么,是指类囊体中的结构细节吗

由于对生物类样品不是很了解,说一下我自己的看法,但很有可能是错的,仅供参考

要看一个样品的细节,排除样品制备不佳的情况,建议还是在高倍下去看,在低倍下,由于分辨率和眼睛的局限,倍数越小,如类囊体的线状是很难分清,但是整体图片的衬度要好

刚才在网上突击的看了一下叶绿体的TEM照片,觉得你拍的图片总体有点乏白,可以考虑用一下不同号的物镜光阑,来增加衬度

在网上看这么一张叶绿体的照片,不知道是不是lz需要获得的效果



http://www.ru.ac.za/emu/temimages/thechloroplast/
zhyl_ahu
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你要看的是叶绿体的片层结构,必须在3万倍左右才能看清的,这就是分辨率和放大倍数的配合关系了。另你的样品在铅染时好像有污染啊。
水云灵仙
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原文由 洪星二锅头(coime) 发表:
没有明白你所说结构细节是指什么,是指类囊体中的结构细节吗

由于对生物类样品不是很了解,说一下我自己的看法,但很有可能是错的,仅供参考

要看一个样品的细节,排除样品制备不佳的情况,建议还是在高倍下去看,在低倍下,由于分辨率和眼睛的局限,倍数越小,如类囊体的线状是很难分清,但是整体图片的衬度要好

刚才在网上突击的看了一下叶绿体的TEM照片,觉得你拍的图片总体有点乏白,可以考虑用一下不同号的物镜光阑,来增加衬度

在网上看这么一张叶绿体的照片,不知道是不是lz需要获得的效果

http://www.ru.ac.za/emu/temimages/thechloroplast/[/quote]

确实,我想要的就是这种效果,在较低倍数下,能看到内囊体或激励片层线状的细节。

顺便问下,物镜光阑怎么调整,以及衬度是什么?拍照时要怎么调呢?多谢了
水云灵仙
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原文由 zhyl_ahu(zhyl_ahu) 发表:
你要看的是叶绿体的片层结构,必须在3万倍左右才能看清的,这就是分辨率和放大倍数的配合关系了。另你的样品在铅染时好像有污染啊。


是的呢,但是倍数太大了,叶绿体就看不到完整的结构了啊?另外,我没有用铅染呢,只用了双氧铀
天黑请闭眼
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原文由 水云灵仙(v2695398) 发表:
原文由 zhyl_ahu(zhyl_ahu) 发表:
你要看的是叶绿体的片层结构,必须在3万倍左右才能看清的,这就是分辨率和放大倍数的配合关系了。另你的样品在铅染时好像有污染啊。


是的呢,但是倍数太大了,叶绿体就看不到完整的结构了啊?另外,我没有用铅染呢,只用了双氧铀


有的CCD相机有montage功能,可以拼图的,不知道效果如何?
洪星二锅头
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物镜光阑是一个很常用的部件,是不是生物用的电镜不配物镜光阑吗,还是物镜光阑对于生物样品可以不用(特别是低倍下,光阑会限制你使用的电镜的放大倍数)?

物镜光阑有好几档,物镜光阑可以提高成像的反差,屏蔽高角度的散射电子,降低图像背底的噪音
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