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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】〖有奖讨论〗谈谈你对液相了解多少？【五月特别活动，马上要结束喽！】

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qingqingcao
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2013/4/27 9:01:52 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你对HPLC真正了解多少？

十一年前大学实习，就搞HPLC 分离药物，现在自己当老师了，教学生HPLC，应该大致懂点吧。

你在实际操作中的经验？

Waters, Agilent, 岛津，日立等HPLC的经验。
2007年在某公司装过HPLC分析柱200多根，修理废柱（填料塌陷）数十根，提供给客户。从事过HPLC分析柱装填技术和装柱机学习。（往事了，想想可怕，详细见我以前的文章）

你一般能判别仪器的故障吗？

大致能够判断吧。比如柱效降低的问题，堵塞问题，泵流速不准确问题，检测器能量问题等。2004年岛津HPLC维护培训。

你在操作中的故障一般如何处理？

自己处理，堵塞，透镜脏，六通阀堵塞等，自己拆卸，更换部件。电路板靠工程师。

你对仪器的结构最了解的是哪部分？

泵，检测器。六通阀，色谱柱。

你一般能设计简单物质的分析方法吗？
从事过食品HPLC分析，食品营养物质分析，药物有效成分提取分析，固相萃取等。

你在HPLC中遇到的问题的解决方法是什么？

小问题自己解决。有疑问，问800，再有问题，查书。

真希望我的学生看看这贴。了解老师的用心良苦啊。

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批注：qingqingcao老师的理论和实践都很过硬哦！也是一名认真负责的好老师。第六届科学仪器

网络原创作品大奖赛将于今年7月如期而至，如果把你的经验写成原创一定很精彩啊！非

常期待。
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2013/4/27 22:59:46 Last edit by jncxyy2012
支点
zhx_fs_ln
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2013/4/27 9:06:52 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学无止境，人无全能。我对液相的认识就是越来越觉得自己无知了，做好自己的定位，液相我们分析的东西一般都有现成的方法，查查资料，省掉自己很多多余的工作，我现在已经基本放弃自己开发方法了，把自己的大部分精力放在了对实验室设备的硬件维护上了。仪器中最了解的真是谈不上，那就算计算机吧，自己用的软件全重装过，硬件都拆过。

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批注：zhx_fs_ln版主很谦虚呦，术业有专攻。你在计算机方面比较精通，已经相当不错了。
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2013/4/27 11:58:21 Last edit by jncxyy2012
wanghongg
wanghongg
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2013/4/27 9:19:29 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hyf020115212(hyf020115212) 发表:
我用液相也不是很长时间，我就分享一下我们的HPLC在应用过程中遇到的问题，我们的液相色谱仪曾报错：plunger homing over press ，因为自己不太懂，所以问了资深同事，他们说很是在线过滤器脏了，只要把在线过滤器拆下来，把其中的滤芯拿去超声清洗即可

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批注：仪器的型号是什么？你们这样处理并解决问题了？


WATERS 的2695，如果第一二次出现超声有效以后可能没用要换滤芯。只是拆的时候和装的时候要当心有时候可能把螺纹拧坏造成漏液

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批注：谢及时反馈，只是想让大家了解的更清楚些。
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2013/4/27 11:59:52 Last edit by jncxyy2012
石凌超
v2709424
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2013/4/27 13:46:19 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使用HPLC有三四年了吧，现在回想起来还真有点特别的感觉，要不是看到这样一个帖子，还真想不起来去回顾我与HPLC的这一段感情经历啊。

第一次真正的的跟HPLC情迷接触是在上一家公司，在那里闲的无聊的几个月里（此处忽略几百字），开始看一个师兄在那里摆弄岛津的2010A-HT，当时具体什么故障记不清了，因为那是我第一次如此近距离而且是专心的去认识HPLC，当时看到那些阀门管线，头有点发懵，大概有二三十分钟的时间，看着师兄拆拆这儿，擦擦那儿，唯一的的一点感触就是师兄好牛逼啊，这么精密的仪器敢自己拆卸，换了我我可不敢（但是谁能想到，几年之后的我，除了非常精密的部件如光路系统等，整个2010A的能拆的地方我都拆过了呢，此乃后话）。

后来的后来，由于我入职的动物细胞培养部门由于资金问题完全没有组建起来，我便跟着师兄学起了分离纯化，没想到这次误入“其”途，成为了我职业生涯的一次重要的转折，因为之后的我再也没有接触过细胞培养之类的东东，而HPLC，却成了我工作中不可或缺的左膀右臂，从最初的岛津2010A-HT，LC-6AD，以及后来的汉邦DAC-100,然后是现在这家公司的沃特世alliance，600等，几乎我都拆过，泵头是最长拆的，因为堵塞（盐析），还有就是六通阀，脱气包，检测池等等。（暂停一下子，又要去拆一个从国外总部借过来的设备，今天要打包送回去，也是高精密的连续色谱设备，不过两个星期下来还没怎么混熟，只能打打下手）。

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批注：以前佩服师兄，现在更为自己的成长而骄傲吧。
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2013/4/27 13:59:53 Last edit by jncxyy2012
制备液相
wzl-x
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2013/4/27 23:51:56 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其实HPLC也没什么复杂的地方，我搞HPLC10年了。
HPLC使用要细致，越精密的仪器越娇气，HPLC也不例外，也就是我们说的样品前处理以及流动相的前处理，有了这两点细致的工作，一般来说仪器主机的故障不会太多。当然，方法学的问题讨论起来可以讨论1年.
故障排除，一般HPLC整体会出现几个常见问题：压力高、压力低：
压力高，可以总结为1个字：堵，很多地方会堵，特别是UPLC更是如此，环境的优劣，流动相的好坏，缓冲盐的切换等等都会导致这些问题，出现堵的问题就是逐级排查，从检测器开始，一段一段的拆。
压力低，可以总结为1个字：漏，输液泵不能泵液体也可以归为漏的范畴内。注意观察管线的漏液情况，现在进口的HPLC都有漏液报警，有的甚至有气体检测报警装置。
总而言之，用仪器一定要细致，你对它马虎他对你就马虎，这个很快就能验证，不像我们人，干了坏事可能很长时间都没得报应，仪器是很快的。

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批注：wzl-x版友搞HPLC十年，对液相的各种故障处理已经游润有余，并且将复杂的问题简单化，将

仪器常见故障归纳为：压力高、压力低。总结的非常好。
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2013/4/28 9:49:35 Last edit by jncxyy2012
temp
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2013/4/28 1:32:41 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我现在写的《每周一贴谈设计》系列就是在写我对仪器的理解咯。LZ应该多给我点奖励，哈哈哈。

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批注：你的《每周一贴谈设计》写的很好，如果加上该部件易出现的故障及解决办法就更完美了。
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2013/4/29 17:53:13 Last edit by jncxyy2012
viziyi
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2013/4/28 16:41:32 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
基层实验室的小妹初接触液相啊，感觉安装工程师教的时候挺简单的，实际运用起来问题还不少，包括些简单的数据分析⊙﹏⊙b汗
努力学习中·····

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批注：大多数初学者都有这样的烦恼，没关系啦，万事开头难，多看看仪器及工作站操作说明书，同

时多来论坛逛逛，液相基本操作很快就能掌握。
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2013/4/28 16:50:58 Last edit by jncxyy2012
孙孝平
v2721779
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2013/4/29 15:11:06 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我刚刚接触，还请老师指点！

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批注：论坛上有很多好的资料你可以了解下，理论和实践相结合，慢慢地就会积累一些经验，不要

着急，饭要一口一口地吃，知识要一点一滴地积累。
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2013/4/29 16:39:23 Last edit by jncxyy2012
liuquan2008
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2013/4/29 16:03:27 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看到在个帖子想想用液相仪器足足有8年了
使用过的液相仪器有岛津安捷伦的 各种型号岛津的10A 2010 安捷伦的1100 1200 1260 刚开始的时候感觉在好复杂 现在想想了解了 还是比较容易的 基本的仪器故障都能够自己解决 基本上不需要配件的情况下能够维修好 电路板除外

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批注：八年不长也不短，用过多种型号的液相，同时也积累了丰富的经验，如果能分享一下你解决仪

器故障的经验会更好。
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2013/4/29 16:53:09 Last edit by jncxyy2012
heyang68
heyang68
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2013/4/30 10:58:19 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱法的核心就是分离，HPLC也不例外，经分离后能有效排除干扰，这也正是现代HPLC法在食品、制药、环境监测、生物工程和生物化学和精细化工的分析中应用都很广泛的根本所在。 所以对于使用者来说，色谱系统的维护在HPLC的应用中极为关键。

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批注：这好像是某篇文章的开头哦，写写你自己的经验和体会该多好。
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2013/4/30 11:59:17 Last edit by jncxyy2012
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