主题：【讨论】“检测直通车”之金银花的鉴别及质量评价

金银花，忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花，主要成分为绿原酸和木樨草甘，是名贵药材之一。由于中药方剂中多用刀金银花，并且今年由药用转向食用和日用化工等因素，价格持续上涨，由此掺假现象也屡被发现。山银花与金银花外貌相似，其主要成分为绿原酸，多被不法商贩掺入金银花中，代替金银花。虽然山银花也为药材，但因其成分中不含木樨草甘，在药用价值和价格上还是有别于金银花。

金银花

金银花的检测方法(高效液相色谱法)

　　一、实验原理

　　试样经粉碎、过筛后，采用甲醇-水溶剂超声提取，后高效液相色谱法测定其中四种组分的含量值，再根据药典规定鉴别其真假判定其质量，主要区别金银花和山银花。

　　二、仪器和试剂

　　高效液相色谱仪带紫外检测器，AS3120超声波发生器;甲醇为色谱纯试剂，实验用水为超纯水。

　　三、试验方法

　　1. 提取

　　测定绿原酸、木犀草苷提取条件为：将样品充分粉碎，粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人50%甲醇50ml,称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50 %甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得A, 上机测定得到绿原酸、木犀草苷的液相色谱图见图1A/B/C。

　　测定灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙提取条件为：将样品充分粉碎，粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人50%甲醇50ml,称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50 %甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得B, 上机测定得到灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的液相色谱图见图2。

A

B

C

图1 标准溶液绿原酸(A)、木犀草苷(B)和样品溶液的液相色谱图(C)

A

B

图1 标准溶液灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙(A)和样品溶液的液相色谱图( B)

　　2 仪器参数

　　2.1 测定绿原酸、木犀草苷液相色谱条件

　　色谱柱： Aglient TC- C18 (250×4.6mm，粒径5μm);

　　检测波长： 350nm;

　　流动相:甲醇-水(含有2mmol/L硫酸)(梯度洗脱);

　　流速：1.0mL/min

　　进样量：20μL。

　　2.2 测定灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙液相色谱条件

　　色谱柱： Aglient TC- C18 (250×4.6mm，粒径5μm);

　　检测波长： 203nm

　　流动相:甲醇-水(含有2mmol/L硫酸)(60:40);

　　流速：1.0mL/min

　　进样量：20μL。

　　3 结果计算和评价

　　采用外标法计算各种物质的含量，再根据下表作出评价。

名称	绿原酸	木犀草苷	灰毡毛忍冬皂苷乙	灰毡毛忍冬皂苷乙+ 川续断皂苷乙
金银花限量指标（%）	≥1.5	≥0.05	不得检出	不得检出
山银花限量指标（%）	≥2.0	不限	不限	≥5.0

　　4 检出限

　　本方法仪器最低检测浓度绿原酸、木犀草苷为1 μg/mL，灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙为10 μg/mL，按照上述样品前处理计算，本方法检出限绿原酸、木犀草苷为0.01%。灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙为0.1%。

　　附图：

　　1、样品粉碎

　　2、检测仪器——高效液相色谱仪

　　3、测试谱图

　　附：中国广州分析测试中心

　　中国广州分析测试中心(简称中广测)——在广东省测试分析研究所基础上建立的国家级的分析测试中心，是以理化分析测试为重点的综合性研究和服务机构，已有50年历史。

　　中广测于1990年通过省级计量认证，1991年通过国家级计量认证，2001年通过中国实验室国家认可。经过多年的发展，中广测目前已成为通过国家级资质认定(CMA)和国家认可(CNAS)的第三方检测、校准实验室和A类检查机构，可向社会提供具有证明作用的测试数据和结果。中广测的管理体系符合ISO/IEC 17025和ISO/IEC 17020的要求，因而也是依据ISO 9001运作的。根据中国合格评定国家认可委员会与美国、欧盟、日本等国家和地区的认可机构达成的互认协议，中广测出具的数据和结果可获得广泛的国际互认。

文章来源：http://www.woyaoce.cn/news/newsdetails.aspx?id=99735