主题：【讨论】光谱仪的使用原理

　　紫外—可见分光光度法是通过测定物质对紫外和可见光的吸收，求出物质的含从或对物质进行定性的方法。它的优点是选择性好，灵敏度高，一般物质可测到。其相对误差虽比滴定分析大，但对微量分析而言.绝对误是极小，符合分析准确度好的要求。光谱仪设备简单.操作便捷，应用广泛，在化工、环保、氏药、卫生、生物等领域中常用来分析物质的组成和结构.测定化合物的含量及研究生化过程等。紫外—可见吸收光讲主要产生于分子中价电子(或外层电子)的能级间的跃迁(吸收能量=两个跃迁能级之差)，所以也将其称为电子光诺方法。不 In1 物质山于结构卜的差异，所需跃迁能从不同.于是呈现出不同的吸收光谱。通过分子的吸收光谱可以研究分子结构并进行定性和定量分析。可见光谱常用于有色物质含量的测定。紫外光谱常用十具有紫外吸收基团的无色物质含量的测定。　　将不同波长的单色光依次通过被分析的物质溶液.分别测得不问波长下的吸收程度.即吸光度A。然后以波长Y为横坐标，吸光度月为纵坐标作图，可得一曲线，即为吸收光线谱。

　　吸收光谱中.吸光度址大处的波长为最大吸收波长，几条曲线分别代表不同浓度时的吸收光讲，它们的形状基本相同，最人吸收波长均为 525mm。溶液浓度愈大，吸收光讲的蜂值愈商，两者成正比关系。若采用最大吸收波长测定吸光度，则灵敏度址高(响应值随浓度的变化幅度最大)，所以一般定长侧定时选择波长作为人射波长。　　吸收光谱的定性依据是其光谱特征，包括吸收光谱的形状、吸收峰的数目、吸收峰的位置(波长)、吸收峰的强度、相应的吸光系数。通过紫外一可见吸收光谱，可进行两种定性分析，即定性鉴别和纯度检查。定性方法有： ① 对比吸收光谱的一致性。同一测定条件下.将待测物与标准对照物讲图或标准讲图进行对照比较。月前有 46 仪幻种化合物紫外光诺的标准讲图。 ② 对比吸收光谱的特征值 ③ 对比吸光度或吸光系数的比值。 ④ 根据峰位敢校情况，进行纯度检查(杂质检查)。

　　2 .测定方法

　　定址分析法有：吸光系数法、标准曲线法、标准对照法。

　　( l )吸光系数法。

　　又称绝对法，在已知吸光系数、吸收池厚度以及吸光度的前提下，直接套用朗伯一比耳定律表达式，可将浓度求算出来。

　　( 2 )标准曲线法。

　　标准曲线法是分光光度法中最为常用的方法：取标准品配成一系列己知浓度的标准溶液，在选定波长处，用同一吸收池分别测定其吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标作图，得一直线 ― 标准曲线。然后将被测溶液置于吸收池中，在相同条件下，测量其吸光度，根据吸光度即用在标准曲线上查得其对应的浓度。该方法对于经常性批从测定十分方便.此外.由于被检侧的样品浓度实际上是与多个标准溶液的浓度相比较而得出的结果，所以更准确和可信。采用此法时，应注意使标准溶液与被测溶液在相同条件下进行测试，且溶液的浓度应在标准曲线的线性范围内。