原文由 小猪飞飞(zpf20031212) 发表:
感谢分享,有几个小问题,请教下楼主:
1. 方法中提到的100ul样品,是指10ml乙酸铵中取100ul进行在线固相萃取吗?
2. 固相萃取最终的洗脱液要经过在线氮吹浓缩吗?如果要,浓缩后定容体积是多少?
3. 液相进样量是多少?
原文由 ABC_D(v2720504) 发表:原文由 小猪飞飞(zpf20031212) 发表:
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1. 方法中提到的100ul样品,是指10ml乙酸铵中取100ul进行在线固相萃取吗?
2. 固相萃取最终的洗脱液要经过在线氮吹浓缩吗?如果要,浓缩后定容体积是多少?
3. 液相进样量是多少?
1:方法中100ul进样,就是从10ml乙酸铵中取100ul进行上样。
2:不需要,所有经过氮吹浓缩的固相萃取方式都不算是严格的在线固相萃取,只能算是一种离线的自动或是半自动方式。本文提到的在线固相萃取,是从小柱上面冲洗下来的待测物直接进入色谱柱分离后,进质谱检测。
3:只有离线的spe,氮吹浓缩后进样才有“液相进样量”这个概念。在线spe没有这个概念。
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2. 固相萃取最终的洗脱液要经过在线氮吹浓缩吗?如果要,浓缩后定容体积是多少?
3. 液相进样量是多少?
1:方法中100ul进样,就是从10ml乙酸铵中取100ul进行上样。
2:不需要,所有经过氮吹浓缩的固相萃取方式都不算是严格的在线固相萃取,只能算是一种离线的自动或是半自动方式。本文提到的在线固相萃取,是从小柱上面冲洗下来的待测物直接进入色谱柱分离后,进质谱检测。
3:只有离线的spe,氮吹浓缩后进样才有“液相进样量”这个概念。在线spe没有这个概念。
小柱最终的洗脱量是多少?
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1. 方法中提到的100ul样品,是指10ml乙酸铵中取100ul进行在线固相萃取吗?
2. 固相萃取最终的洗脱液要经过在线氮吹浓缩吗?如果要,浓缩后定容体积是多少?
3. 液相进样量是多少?
1:方法中100ul进样,就是从10ml乙酸铵中取100ul进行上样。
2:不需要,所有经过氮吹浓缩的固相萃取方式都不算是严格的在线固相萃取,只能算是一种离线的自动或是半自动方式。本文提到的在线固相萃取,是从小柱上面冲洗下来的待测物直接进入色谱柱分离后,进质谱检测。
3:只有离线的spe,氮吹浓缩后进样才有“液相进样量”这个概念。在线spe没有这个概念。
小柱最终的洗脱量是多少?
对这个项目来讲,大约在100ul左右,这对于LC来讲可能少许有点大,但是在线SPE还有一个设计,就是在待测物从spe小柱洗脱以后,在进HPLC色谱柱以前,还可以加一路溶剂稀释。稀释的作用并不是稀释待测物,而是加大水相比例,让待测物在色谱柱头富集。这样,即便洗脱的体积大也没什么关系了,因为待测物在柱头又会重新富集,等你升高有机相时,它才继续以一个很窄的色带往前迁移。不知这样解释得是否清楚?
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1. 方法中提到的100ul样品,是指10ml乙酸铵中取100ul进行在线固相萃取吗?
2. 固相萃取最终的洗脱液要经过在线氮吹浓缩吗?如果要,浓缩后定容体积是多少?
3. 液相进样量是多少?
1:方法中100ul进样,就是从10ml乙酸铵中取100ul进行上样。
2:不需要,所有经过氮吹浓缩的固相萃取方式都不算是严格的在线固相萃取,只能算是一种离线的自动或是半自动方式。本文提到的在线固相萃取,是从小柱上面冲洗下来的待测物直接进入色谱柱分离后,进质谱检测。
3:只有离线的spe,氮吹浓缩后进样才有“液相进样量”这个概念。在线spe没有这个概念。
小柱最终的洗脱量是多少?
对这个项目来讲,大约在100ul左右,这对于LC来讲可能少许有点大,但是在线SPE还有一个设计,就是在待测物从spe小柱洗脱以后,在进HPLC色谱柱以前,还可以加一路溶剂稀释。稀释的作用并不是稀释待测物,而是加大水相比例,让待测物在色谱柱头富集。这样,即便洗脱的体积大也没什么关系了,因为待测物在柱头又会重新富集,等你升高有机相时,它才继续以一个很窄的色带往前迁移。不知这样解释得是否清楚?
取样量少基质效应较低,在液质上应该比较有优势。所用的固相萃取小柱也是商品化的柱子?柱子的填料量是多少?只需要100ul洗脱液就可以完全洗脱下来?手动固相萃取洗脱时没尝试过这么少的洗脱体积。仪器所配套的液相色谱是常规的液相吗?