做
液相色谱的时候,我们通常强调进样溶液用流动相稀释、定容。
有的时候我们随意一点,直接拿水或纯有机相稀释、定容,进样后对峰型和灵敏度也没什么影响,有的时候,这种影响是很严重的。
前几天,做了下展青霉素,流动相为水-乙腈(90:10),柱子为C18柱,紫外285nm检测。定溶液的影响就是属于影响很大的那一类。配制了有机溶剂含量不同的系列标准溶液进样。见下面的谱图,谱图中两个峰分别为5-羟甲基糠醛和展青霉素。
纯水
5%甲醇
10%甲醇
20%甲醇
30%甲醇
40%甲醇
50%甲醇
60%甲醇
随着有机相比例的增加,峰型逐渐变的矮胖,最后变成馒头一样。