主题：【求助】液相色谱检测吡虫啉怎么不出峰

标样液标1ml浓度大于98.5%，不知真是浓度有多少，也就是说1ml中吡虫啉的质量是多少。

稀释至20ppm(乙腈=水1+3）或纯乙腈或纯水都在实验  c18柱250*4.6 5um    紫外检测器270

流动相 1 -      甲醇水（1+1）1.0ml/min

流动相 2 -      乙腈水（1+1）0.75ml/min  以下皆是此流速

流动相 3 -  梯度    时间    磷酸0.1%-水溶液        乙腈

                              0            85                                    35

                            5            80                                    20

                            35            75                                    25

                            36              0                                  100

                            46            85                                  15

流动相 4 -  梯度    时间    水溶液                        乙腈

                            0                95                            5

                            15              75                          25

                            20            95                          5

流动相 5 -  梯度    时间    水溶液                            乙腈

                              0            80                                  20

                            10          45                              55

                            11          20                              80

                            15          20                              80

                            16          80                              20

                            20        80                              20

流动相 6                乙腈-0.2%乙酸（20:80）

都不管用，不出峰，为什么，看资料里很容易就出峰。求助