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透射电镜（TEM）
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主题：求助：小鼠囊胚透射电镜样品制备

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zhuomuniao
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2006/11/15 17:11:00 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
老师，还有一个问题:
  812配好之后，保存在-20度，能保存多少时间？
  812是不是在低温和室温下不聚合，不变硬？
  812聚合时的温度是采取37度过夜，45度12h,60度24h,还是直接在60度聚合 48h.这两种方法那种比较好？
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wanyuanjiang
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2006/11/16 10:07:00 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得酒精和丙酮各有好处，丙酮与树脂结合能力比较好，但是遇到细嫩的组织（如卵细胞）就不行，会使组织皱缩；酒精与树脂结合不是很好，需要加长渗透时间和梯度，但是对于细嫩组织形态的维持效果比较好。               
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zhuomuniao
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2006/11/16 10:33:00 23楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢，指教，那么我开始用酒精脱水，到最后时用100%丙酮代替酒精，采取丙酮与812包埋剂1：1混合渗透，这样可以吗？
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wanyuanjiang
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2006/11/16 10:47:00 24楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得丙酮和酒精各有利弊：丙酮和树脂比较容易结合，但是容易破坏细嫩组织的结构（如鱼卵细胞）；酒精与树脂结合效果稍差，需要加长渗透时间和梯度，但是对细嫩组织的结构维持效果好。
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wanyuanjiang
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2006/11/16 11:26:00 25楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以这样操作的，我们一般都是先用酒精，到100%的时候在改用丙酮；有一个省事的渗透方法：在丙酮：树脂是1：1后，直接加多一份树脂就可以到1：2的比例了；这样就不用先去掉1：1的渗透剂，也不会浪费这一步骤的树脂。
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zhuomuniao
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2006/11/16 14:59:00 26楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好办法，谢谢！
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zhuomuniao
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2006/12/1 9:24:00 27楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想做免疫电镜。但不知道做包埋前还是做包埋后的好？我有812包埋剂，这种包埋剂做包埋前的免疫电镜比较好。但是不知道免疫标记效果如何？
用低温包埋剂做包埋后免疫电镜比较后， 试验重复性好。但是本试验室没有-40度冰箱和紫外线等。
  各位大虾快来帮帮我。
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