求助各位大侠，有没有测过细胞的拉曼光谱。我们用的雷尼绍的仪器，785nm激发光，背景信号太强，一点细胞的信号都测不出，怀疑激光没有聚焦在细胞上。

1. 细胞测量前要怎么处理？

2. 细胞放在什么样的载玻片上测量，怎样减小背景影响？

3. 仪器参数设置上有什么需要注意的么？怎样确定把光聚焦到细胞上？

老板逼得紧，谢谢各位啊!

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2013/9/11 17:43:33 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有测细胞的报道，中文文献都有很多，你去搜索一下看看吧

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muziqianli

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2013/9/25 15:28:26 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 拉曼论坛(nanbowan) 发表:

有测细胞的报道，中文文献都有很多，你去搜索一下看看吧

我已经看过很多文献了，照着文献上写的做实验都做不出来，很多文献也写的不清楚，所以想问问真正做过细胞实验的人。您做过细胞光谱实验吗？

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2013/9/26 15:28:26 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 muziqianli(muziqianli) 发表:
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有测细胞的报道，中文文献都有很多，你去搜索一下看看吧

我已经看过很多文献了，照着文献上写的做实验都做不出来，很多文献也写的不清楚，所以想问问真正做过细胞实验的人。您做过细胞光谱实验吗？

我做过拉曼标记物质进入细胞之后的拉曼，但是测的是标记物的信号，没有测过细胞本身的信号。

细胞也混合物，而拉曼表征的最好是单一分子结构的物质，否则就存在检测限的问题，如果这个混合物每一种的含量都很少，或者其中有荧光很强的分子，那么很难测到信号。

另外是不是得对细胞进行前处理啊？

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2013/9/29 9:33:49 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

细胞检测是很难做：样品处理，信号采集
文献上别人用拉曼成像做的图很漂亮，看起来很吸引人，
国内能做好这一块的还真不多，广西那边做光镊拉曼的课题组，主要做细胞
不过他的技术和共聚焦显微镜技术不同

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天狼

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2013/10/6 13:40:40 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

做细胞的成像难度很大，关键在于共聚焦。
另外建议你785激发时，不要用玻璃，激光穿透深度很大时，衬底信号很强。

532激发也可以的

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2013/10/8 16:31:23 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 拉曼论坛(nanbowan) 发表:
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原文由 拉曼论坛(nanbowan) 发表:

有测细胞的报道，中文文献都有很多，你去搜索一下看看吧

我已经看过很多文献了，照着文献上写的做实验都做不出来，很多文献也写的不清楚，所以想问问真正做过细胞实验的人。您做过细胞光谱实验吗？

我做过拉曼标记物质进入细胞之后的拉曼，但是测的是标记物的信号，没有测过细胞本身的信号。

细胞也混合物，而拉曼表征的最好是单一分子结构的物质，否则就存在检测限的问题，如果这个混合物每一种的含量都很少，或者其中有荧光很强的分子，那么很难测到信号。

另外是不是得对细胞进行前处理啊？

我们实验之前有对细胞进行离心和清洗，开始用的是PBS，影响信号太大，后来换成蒸馏水，这种情况下细胞又很快就吸水涨破了。关键还是细胞的信号太弱，测不出信号。现在用铝片做载玻片，因为不透光，又很难找到细胞。。

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2013/10/8 16:48:10 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 shengsh(shengsh) 发表:
细胞检测是很难做：样品处理，信号采集
文献上别人用拉曼成像做的图很漂亮，看起来很吸引人，
国内能做好这一块的还真不多，广西那边做光镊拉曼的课题组，主要做细胞

不过他的技术和共聚焦显微镜技术不同

对，国内做细胞拉曼主要就是广西那块，他们用的是光镊技术，能捕捉到细胞。

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muziqianli

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2013/10/8 16:49:36 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 天狼(v2683155) 发表:
做细胞的成像难度很大，关键在于共聚焦。
另外建议你785激发时，不要用玻璃，激光穿透深度很大时，衬底信号很强。

532激发也可以的

我们现在换成633的了，之前用过石英，氟化钙当衬底，都不行，现在用的铝片。您做过532的吗？

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天狼

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2013/10/10 3:24:06 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 muziqianli(muziqianli) 发表:

原文由 天狼(v2683155) 发表:
做细胞的成像难度很大，关键在于共聚焦。
另外建议你785激发时，不要用玻璃，激光穿透深度很大时，衬底信号很强。

532激发也可以的

我们现在换成633的了，之前用过石英，氟化钙当衬底，都不行，现在用的铝片。您做过532的吗？

用过488，532，633和785测试细胞成像，结果还不错

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