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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：求助:吸光度

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xl1209
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发表于：2006/08/12 21:51:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
今天测麦芽糖酶的浓度时做标准曲线,测出的吸光度全是负值,且浓度越大吸光度越小.曲线的相关系数是0.9989.使用仪器型号的是Lambda25.
哪位大侠给解释一下,这是怎么回事?
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haypiny
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2006/8/13 12:29:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
波长搞错了吧,还是参比不对?
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xl1209
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2006/8/13 15:22:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
波长是按书上说的508nm,参比溶液和做标准曲线的标准溶液配置基本一样,只是不含要测的麦芽糖,这种参比应该成为试剂空白吧?我感觉参比溶液应该也没问题.郁闷!
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初学者&九点虎
zhouyuhu
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2006/8/13 16:17:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
那就是空白的问题,空白的吸光度比样品溶液的吸光度大,出来的就是负的.
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xl1209
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2006/8/15 22:04:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题解决了,是我操作方法不对.今天问工程师,他说lambda25是双光路的,有两个池,参比和样品都放在第一个池里测,不要用第二个池.我按他说的做了一下,果然可以了,是正值.以前没见过这种用法,说明书上也没看到,当时工程师调试在场的老师也忘掉了操作方法,于是我按一般的紫外光度计操作,在第一个池里放参比调零,然后在第二个池里放样品溶液,结果就出现了负值的情况.
现在可以正确操作了,不过搞不明白,第二个池是干吗用的,知道的给解释解释.谢谢!
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