这批柱子早就寄过来了,一支没想起来做。前几天做实验,刚好要用到这款柱子做前处理,就顺便做了下不同厂家同型号柱子的比较。没有什么明显的差异。另外两个柱子,A为安捷伦公司产品(以前的瓦里安的产品),B是国内的另一品牌。
实验:伏马菌毒素检测
仪器:WATERS ACCQUITY UPLC-XEVO TQ MS/MS
色谱柱:WatersACQUITY UPLC BEHC18:100 mm×2.1 mm,1.7 μm或相当柱。 流动相:A:0.1%甲酸水溶液,B:50/50的乙腈/甲醇。 流动相洗脱程序如下:![]()
流速:0.35 mL/min 柱温:40℃ 进样量:5 μL 前处理: 准确称取2 g(精确至0.01 g)样品于50 ml离心管中,加入同位素内标10 ng(100 ng/ml,100微升),加入10 mL 乙腈-水(50-50),均质提取3 min,以10 000 r/min于4℃下离心10min,将上清液转移至另一离心管中,用NaOH(0.1 mol L-1)溶液调pH值到6-9。取3 ml加入8 ml的30/10的甲醇-水溶液,混合均匀后过强阴离子交换固相萃取柱(使用前按要求活化),再分别用8 ml的甲醇/水溶液(3:1)和3 ml的甲醇淋洗,用10 ml的99/1的酸化甲醇溶液洗脱,55℃下氮吹至干,乙腈/水溶液(20-80)定容至1 ml。涡旋30 s,过0.22 μm微孔滤膜后供进样。 取三个不同品牌的SPE柱子,每个品牌3根,平行处理,每个样品平行进样2针。结果见下表![]()
三种柱子处理后的谱图见下:
出峰顺序分别为FB1,FB3,FB2。Column C即为安谱产品 CNWBOND SAX。三种柱子的规格均为500mg,6ml。从验证结果来看,三种柱子对伏马毒素的净化效果无明显差别。