一个品种,2ml/min
的流速,压力超级的高,都到320bar
左右了。(【原创】面对奇葩压力的应对措施http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20140328/5250808/)直接的后果就是,经常把柱子两端的PEEk
头崩开,严重影响实验进度。不知道换成其他厂家的色谱柱,会不会让压力有些改观,没有这么奇葩呢?抱着这样的态度,用博纳艾杰尔的Venusil XBP C18(L)
色谱柱试了一下,下面把尝试的结果通报一下。300bar
压力用的是waters
的3.5μm
的C8
色谱柱。而换成博纳艾杰尔的C18的色谱柱的时候,压力仅为160bar
左右!仪器设备:安捷伦液相色谱仪,色谱柱:W,C8,4.6*150mm,3.5μm;博纳艾杰尔,Venusil XBP C18(L),4.6*150mm,5μm,(Cat:VX951505-L,S/N:V9520515BM0106)。色谱条件:以甲醇-乙腈-水(270∶320∶410)为流动相A,以甲醇-乙腈-水(410∶490∶100)为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为225nm,流速为2.0ml/min,柱温为40℃。 时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 100 | 0 |
25 | 100 | 0 |
55 | 0 | 100 |
65 | 0 | 100 |
66 | 100 | 0 |
70 | 100 | 0 |
结果:1.W色谱柱的色谱柱:
2.博纳色谱柱的色谱图:
讨论:1. 从色谱图的结果来看,C18也可以干C8的活;
2. 3.5μm的填料,也不是非用不可;5μm的填料一样可以实现对目标物的分离,而且试验压力更小,更有利于对色谱柱和色谱仪的保护;
3. 博纳的色谱柱多了23min的保留峰,从对照品的定位来看,是主峰的一个降解产物,也符合主药的降解规律。
4. 最后不得不说,博纳的色谱柱,分离效果确实不错。