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液质联用（LCMS）
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主题：【已应助】LTQ ORBITRAP 液质联用仪定量分析氨基酸代谢物线性差

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david6218
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发表于：2014/04/24 22:06:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我实验室质谱是LTQ orbitrap, 主要用来做蛋白组学，最近有客户要做氨基酸代谢物定量分析，我建立分析方法，采用一级MS全扫，提取离子定量，做标准曲线（不含基质）发现6个物质只有一个线性在99%以上，其余在96-99之间，标曲6个点最高2ug/ml，最低2ng/ml, 在高浓度区域的点（2ug,1ug）总是在线性下面，响应偏差，形成往上抛物线状，高中低浓度的精密度均很好。是不是浓度过高造成离子抑制，做了些改进，在样品和流动相中均提高甲酸浓度，并在离子源部分提高气流，电压等，线性并未改善。我的样品采用5%DMSO溶解（含甲酸， 不好溶解，所以用DMSO）, 流动相采取乙腈-水（含甲酸）。我看到很多文章在用此方法标曲线性均在99以上，可是我总是达不到。是不是离子阱不适合分析这类样品，或者确实是非线性，要用加权最小二乘进行处理。各位有什么建议，做哪些改进能提高线性呢？先行谢过。
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fensire
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2014/4/24 22:24:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
换流动相试试？比如用甲醇和水（含甲酸），或者干脆缩小线性范围吧
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david6218
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2014/4/25 8:37:07 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相可以换换试一下，还有把2ug点去掉试试，
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八杯水
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2014/4/25 9:33:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你设的浓度点范围是不是有点宽了？
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ie4680180
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2014/4/25 11:23:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
浓度点范围有点宽了，把2ug点去掉也好。
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david6218
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2014/4/25 21:03:50 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我把流动相换成甲醇和水（含甲酸），去掉2ug的点，有的检测信号增加有的下降，线性还是基本在95-99之间，抛物线状，不解高浓度信号为何总是下降
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hujiangtao
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2014/4/26 8:17:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
线性范围有点宽了
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liufeilzu
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2014/4/27 15:28:14 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是ft的扫描？还是ltq的扫描？建议修改一下分析时间
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david6218
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2014/5/26 22:21:12 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
FT扫描，LTQ精度不够，范围太宽了，改为5-500，线性良好
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yellow47
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2014/6/5 11:52:23 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
orbi能进的离子数目很有限，用FT来定量的话很容易就饱和了
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皮皮娟
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2014/6/5 12:01:19 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
LTQ orbi  这玩意  跟tof 一样 线性窄了点，要做定量不要范围太宽了。
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