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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】从事药物蛋白相互作用的请进

浏览0 回复24 电梯直达
dickwang2008
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发表于：2006/08/27 17:24:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被luqinhua设置为精华；
各位从事D-P相互作用的战友，我们在实验中肯定遇到很多问题难以解决，但我们有没有志同道合的去讨论，这在很大程度上影响了我们的实验进展。现在我想倡议：
    希望留下自己的e-mail或其他的联系方式，有问题一起来讨论，迅速而有效率的解决。
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huchen
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2006/8/28 10:09:00 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
您好,我将打算做着一面的内容,不知道遇到什么问题呢!
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dickwang2008
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2006/8/28 13:01:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你是哪个学校 的呢？
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huchen
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2006/8/28 16:38:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
广西师范大学，本来打算做，但是蛋白质在毛细管容易吸附，所以后来就换了，现在还想做呢！你是那个学校的呢？
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dickwang2008
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2006/8/28 20:24:00 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
沈阳药科大学得
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huchen
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2006/9/27 16:04:00 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我现在已经尝试作了几种药物和HSA的相互作用,遇到一些奇怪的问题!利用ACE的方法药物的峰的面积不减小反而增大!淌度移动法没有什么规律可以发现,望能给予帮助!我的QQ:  415895876
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芝兰
luqinhua
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2006/9/27 17:37:00 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般的ACE法是固定蛋白的浓度，改变药物的浓度，将蛋白作为样品，而药物则添加到缓冲液中，通过测定蛋白迁移时间的变化，得出结合常数。
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舒衫游鹭
jack2070
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2006/9/28 15:11:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果解决或尽量避免蛋白吸附的问题，下面是几种方法：
1。modification of capillary inner wall;（我没做过，效果应该不错的）
2. 区段灌注毛细管电泳法。我们实验室有人做，效果还可以
3. 前沿分析法。我就用该法做过BSA与一些环境毒物的相互作用
3。换一种毛细管，比如说不采用石英毛细管，采用四F乙烯毛细管......
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芝兰
luqinhua
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2006/9/28 17:25:00 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 jack2070 发表:
如果解决或尽量避免蛋白吸附的问题，下面是几种方法：
1。modification of capillary inner wall;（我没做过，效果应该不错的）
2. 区段灌注毛细管电泳法。我们实验室有人做，效果还可以
3. 前沿分析法。我就用该法做过BSA与一些环境毒物的相互作用
3。换一种毛细管，比如说不采用石英毛细管，采用四F乙烯毛细管......

有道理！
其它方法还有在缓冲液中加入甘氨酸等两性离子，类似于毛细管内壁动态改性，也可以降低蛋白的吸附。
用1M NaOH 冲洗毛细管就能将吸附的蛋白洗脱。
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huchen
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2006/9/30 11:29:00 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢!各位! 我有一个问题,就是在做药物和蛋白质相互作用的时候,一般选用的电解质溶液除了选用混合磷酸盐PBS外,其他的能不能用呢?因为我的药物峰和电渗流标记峰重合!
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芝兰
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2006/9/30 22:52:00 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 huchen 发表:
谢谢!各位! 我有一个问题,就是在做药物和蛋白质相互作用的时候,一般选用的电解质溶液除了选用混合磷酸盐PBS外,其他的能不能用呢?因为我的药物峰和电渗流标记峰重合!

其它的也可以用的，有的用Tris-HCl缓冲体系，只要是模拟等渗的缓冲液就可以了。
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