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主题：【求助】关于western 实验

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小肉金刚
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发表于：2014/08/15 11:11:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我前几天做western 实验，膜是用ECL染色的，感觉样品刚拍的时候信号很强，但是第二天重新拍就会发现信号比原来猝灭的很快，是怎么回事啊？求高手指点。
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2014/8/15 11:40:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、含HRP的抗体
抗体是很重要的一方面因素，对抗体方面来说，建议你适当降低抗体的浓度，看是否有改善；
2、做western实验时快速操作能缓解“淬灭”的问题，而且在样品拍摄期间一定要保证膜不能干，否则拍摄效果很差；
3、另外，对发光试剂ECL试剂来说，除过氧化物因接触空气被逐渐还原外，ECL的成分通常都不稳定，我们实验室原来用过自配的A液和B液，初用效果还行，用一段时间就明显感觉还是不如大牌子的效果好啊，建议你选用市售发光稳定的发光试剂来解决“淬灭”的问题，有些试剂贵点也有它贵的道理呀。

希望赛智可以帮助您。
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lkjj11
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2014/12/20 17:50:21 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上的解释很清楚了
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手机版： 关于western 实验
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