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主题：【求助】摸方法

浏览0 回复11 电梯直达
zenghaijin
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发表于：2014/10/20 22:07:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我想请问下各位高手，一般的摸方法的步骤是咋样的？最好详细具体些，谢谢！
该帖子作者被版主 夏天的雪加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
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2014/10/20 22:50:08 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先看看资料
【资料】实用HPLC方法的建立 ppt
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091107/2199122/
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：应助
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夏天的雪
bingwang228
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2014/10/21 9:32:44 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以先查阅相关资料，如果能找到相同或相似物质测定的方法，然后根据文献资料对色谱和前处理条件进行优化；如果没有相关资料，就需要根据物质性质进行摸索了
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浪淘沙隐
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2014/10/21 9:47:40 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
网上查的，一般也就含量方法能用，有关物质方法因为合成路线的不同而可能就不同。方法开发过程还真不是几句话几段话就能说清楚的，必须实践操作，成功开发几个不同类型的方法，同时掌握一些理论知识，才能总结经验，开阔视野。
最后，建议不要去网上找方法——除非实在弄不出来，这样从一开始就是自己的思路，才能最快的掌握方法开发的技巧。
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浪淘沙隐
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2014/10/21 9:55:40 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
含量方法就不说，相对简单一些。有关物质方法，需要找合成要到所有已知杂质的对照品和分子式，分析杂质的分子结构，看是否有特殊结构，如没有就用一般的流动相和梯度，配置杂质混合溶液（一般待测物正常浓度，杂质0.1-1%浓度），进样分析，如有必要每个杂质都进行定位；结果出来后，分析峰形、分离度和保留情况，再根据情况进行优化。如果有特殊的分子，比如强极性，这样可能一开始就需要尝试其他方法。
实际犯法开发过程，可能需要针对不同的情况，采取不同的对策，比如尝试调整分离度时，如果两个分离度不好的物质，保留时间已经有20min左右了，那么这时候调整梯度可能效果不好，如果它们是带有酸碱性的，那么调整流动相的pH可能有奇效；如果没有酸碱性，那么还可以尝试调整有机相种类以及色谱柱等。
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wslmpol
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2014/10/23 11:12:16 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
哈哈，楼主你问的这个问题可以让专家写一本书了。。。
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牛一牛
v2700892
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2014/10/23 12:46:03 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大方面定下下来，小方面再慢慢琢磨。
大方面如：如样品的结构、极性，确定下用什么系统，反相或正相，流动相体系定下来，如离子对或一般试剂，这个过程中酸度值要考虑到。
小的方面如：色谱柱的选择，氨基柱、c18、c8，长柱子或短柱子。
这些也不是一次就能定下来的，还是要多次试验的，要不就不叫摸索了，很多教科书上面的玩意都重现不出来的。
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hujiangtao
hujiangtao
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2014/10/24 10:25:04 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一步先查文献呵呵
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有水有渝
xky0230699
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2014/10/24 13:36:18 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
摸方法的首先要根据你掌握的资料，先初步确定一个基础方法，然后对方法的各个方面逐一进行验证，通不过验证就改进，直到每一项都符合方法学要求。
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大冰心大冰心
v2932315
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2014/10/24 14:26:13 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最好确定的是检验波长，其次是流动相PH，在根据检测物的性质确定初始流动相，根据样品跑的情况来确定等度或者梯度，梯度的话还要试流动相的比例，柱子的话也要试，流速温度等就是最简单的了，比较好控，具体的给你分享一个资料，希望对你有用
附件：
方法开发.pdf
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zenghaijin
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2014/10/28 21:32:46 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
先看看资料
【资料】实用HPLC方法的建立 ppt
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091107/2199122/
  谢谢，很全面
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