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主题：【讨论】与版友讨论722可见分光光度主出现了吸光度为负值的情况

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刘彦刚

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发表于：2014/11/19 05:47:38 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有版友问：在做实验的时候，发现722可见分光光度主出现了吸光度为负值的情况，通过调整入射光，发现吸光度越来越小，最后出现了负值，这样应该不正常吧，是仪器坏了么？

就从该版友说到的上述情况，不能判断正常用与否；也不能说明仪器是否坏了。我们要知道：吸光度和透射比都是相对的量，如果用蒸馏水作为参比，调吸光度为零；当置入相对于蒸馏水更不透明的被测液，则吸光度为正。反过来用相对于蒸馏水更不透明的被测液为参比，调吸光度为零；当置入蒸馏水时，自然吸光度就为负值。该版友你说是吗？这样结合你当时的情况，你能明白了吗？

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2014/11/20 3:57:14 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

吸光度和透射比都是相对的量，由于选择的参比物不同，吸光可能为正，也可能为负；因为吸光度与透射比之间存是负对数关系，所以对于透射比由于选择的参比物不同，有可能小于100%，也有可能大于100%。

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delightbbh

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2014/11/20 15:21:04 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢老师指导，马上就去试试能不能成功！刚刚在网上差资料，说纯水没有吸光度，是这样么，之前单独测了纯水的吸光度，还是能测出来的。

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2014/11/21 8:19:42 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

在用纯水调零的时候，对入射光有什么要求么，调零之后，测的样品依旧会出现负值，只是这次460没出现，480的时候出现了，还有，这些样品的峰值出现在300左右，是不是要调整一下入射光条件，以后选择240到440之间的入射光会好。

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2014/11/21 8:23:07 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

大家所说的调零是在选定入射光以后在进行的调零，我需要一个完整的图谱，这样的调零该怎么办呢？

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2014/11/21 12:34:37 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 delightbbh(v2962047) 发表:
在用纯水调零的时候，对入射光有什么要求么?

没有什么特别的要求，只是波长应调为接下来测样品时的所需波长。

调零之后，测的样品依旧会出现负值，

如果仪器本身是正常的话，此时只能是被测样品较纯水更透明。

只是这次460没出现，480的时候出现了，

是否有可能你在460nm时，置入纯水调零后，又将波长调到480nm后没有置入纯水调零，而光源在480nm时更强。

还有，这些样品的峰值出现在300左右，是不是要调整一下入射光条件，以后选择240到440之间的入射光会好。

那是肯定的，300nm本就是紫外了，用722可见光分光光度计本就不合适。应该用紫外-可见分光光度计，当然现在有的可见分光光度计，在近紫外时加一滤光片，称之为近紫外可见分光光度计。但毕竟钨灯在紫外光区没多少能量，这样的状况难免仪器不能正常工作。