主题:【求助】比较弱的问题:死时间这样算肯定错了?请帮忙解释

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liushao911
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按照一般的理论 样品峰要在死时间的3倍时间以后出现较好

我有这么一个试验:流速0.5ml/min色谱柱4.6*150mm 进样口到检测器之间的距离为500mm

那死时间应该是死体积除以流速的结果:

V0=3.14*2.3*2.3*150/1000+350*1.59*1.59*3.14/1000≈5.3ml

T0=5.3/0.5=10.6???

我的一个峰2分钟多一点就出来了 岂不是毫无可取之处?

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确实是错了,错的很远。
死体积的计算:
(1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
0.1*L是5um填料的经验公式。
色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
(2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。
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liushao911
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确实是错了,错的很远。
死体积的计算:
(1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
0.1*L是5um填料的经验公式。
色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
(2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。


这样的话 死时间应该是3min,我是不是应该考虑降低一个峰延迟到3min以后出现?
小不董
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管路内径肯定不是1.59mm,一楼的也说了色谱柱内大部分也被填料填充了,所以你的算法是有问题的。
0.5ml/min的速度,死体积在2-3min应该算正常。
支点
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柱子里填满了填料,死体积是填料间的空隙和管路的容积。一般进样是有溶剂峰,溶剂峰的出现时间可以认为是死时间。再乘以流速得到相应的死体积。
夏天的雪
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找一不保留物质,如尿嘧啶等测试死时间,然后乘以流速就是死体积,该死体积是系统加上色谱柱的死体积,现在的系统死体积都很小,可以忽略
liushao911
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原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
找一不保留物质,如尿嘧啶等测试死时间,然后乘以流速就是死体积,该死体积是系统加上色谱柱的死体积,现在的系统死体积都很小,可以忽略


你的意思就是由此物质的出峰时间作为判定吧
dywzqbx
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原文由 liushao911(v2865837) 发表:
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确实是错了,错的很远。
死体积的计算:
(1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
0.1*L是5um填料的经验公式。
色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
(2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。


这样的话 死时间应该是3min,我是不是应该考虑降低一个峰延迟到3min以后出现?


计算所得始终只是理论值,实际运用中还是会用溶剂峰的出峰时间作为死时间
夏天的雪
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找一不保留物质,如尿嘧啶等测试死时间,然后乘以流速就是死体积,该死体积是系统加上色谱柱的死体积,现在的系统死体积都很小,可以忽略


你的意思就是由此物质的出峰时间作为判定吧
是的,约等于死时间
flyaway
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确实是错了,错的很远。
死体积的计算:
(1)色谱柱的死体积V=0.1*L=0.1*15=1.5 ml。
0.1*L是5um填料的经验公式。
色谱柱内径为4.6mm,内部是有填料的,占了绝大部分体积,自然是不能按照你那样算的。
(2)进样器到检测器之间管路体积:进样到检测器之间的管路很细,就是为了减小死体积的,内径好像是0.2~0.3mm之间(记不太清楚,可以自己去查查),绝对不会是3.18 mm内径,你可以去确认下。这一段的体积与色谱柱相比基本是可以忽略不计的。
此外,计算只是理论值,与实际实验结果有差距是很正常的。


这样的话 死时间应该是3min,我是不是应该考虑降低一个峰延迟到3min以后出现?


计算所得始终只是理论值,实际运用中还是会用溶剂峰的出峰时间作为死时间


一般用在色谱上用没有保留的化合物测定死时间/死体积吧,溶剂峰的影响因素太多,形状、出峰时间也可能会变化。
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2014/12/26 8:42:29 Last edit by flyaway
liufeilzu
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楼主用的是色谱柱,不是一根根钢管,你算柱子的死体积明显偏大
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