UPLC的原理与HPLC相同,所改变的地方主要有以下几点:
1:小颗粒、高性能微粒固定相的出现。HPLC色谱柱,例如常见的十八烷基硅胶键合柱,它的粒径是5um,而UPLC的色谱柱,会达到3.5um,甚至1.7um,具有更高柱效,更加利于物质分离。
2:超高压输液泵的使用。由于使用的色谱柱粒径减小,使用时所产生的压力也自然成倍增大。故
液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。
3:高速采样速度的灵敏检测器。
4:与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍,它缩短了分析时间,同时减少了溶剂用量降低了分析成本。
5:UPLC比HPLC更为优越,主要表现为更高效的分离效率,即分析时间更短和分离度更大。