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主题：【讨论】看图解读畅谈之二：流动相与吸光度

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夏天的雪
bingwang228
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2015/3/9 16:35:24 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
波长的减小，会使溶剂中在低波长下，具有强紫外吸收（对于UV检测器）的杂质吸收紫外光，表现为基线的波动和干扰峰。
低波长下干扰多
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一片枫叶
v2960432
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2015/3/9 22:02:36 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
低波长下干扰多
是的，低波长下，溶剂中杂质的紫外吸收相对较高，在用UV检测器进行检测时，干扰峰显得更突出。
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支点
zhx_fs_ln
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2015/3/10 11:04:16 23楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
好像图上都是紫外性能会体现在检测器信号的上。与反相键合相色谱分析没多大关系吧。
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一片枫叶
v2960432
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2015/3/10 12:29:47 24楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 支点(zhx_fs_ln) 发表:
好像图上都是紫外性能会体现在检测器信号的上。与反相键合相色谱分析没多大关系吧。
通过比较直观地了解不同溶剂的紫外吸收性能，可以更好地理解在反相键合相分析中遇到的异常现象，以便于采取妥当的措施解决存在的问题，应该多少有点帮助的。是不是？
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夏天的雪
bingwang228
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2015/3/10 16:27:17 25楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
是的，低波长下，溶剂中杂质的紫外吸收相对较高，在用UV检测器进行检测时，干扰峰显得更突出。
紫外中低波长更常用
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一片枫叶
v2960432
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2015/3/14 0:49:28 26楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
紫外中低波长更常用
在大于200nm小于300nm的波长下，甲醇的吸光度大于乙腈的吸光度，是通常情况下选择乙腈而不选择甲醇做流动相的依据，紫外吸收本底高会使低吸光度组分产生负峰。
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golden1987
golden1987
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2015/3/14 16:21:34 27楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱纯的试剂经过0.2μm滤膜滤过，一般出去有紫外干扰的杂质，分析纯中含有紫外干扰的物质很多，使用分析纯的结果就是基线背景高，噪音大，掩盖杂质检测（尤其在低波长下），另外长时间使用分析纯的试剂，毁损伤仪器和色谱柱。
对于选择甲醇和乙腈，这个问题应该具体问题具体分析，理论上乙腈的粘度低，洗脱能力强，截至波长190nm，适合低波长下使用。但是乙腈的价格昂贵，毒性相比于甲醇大，与水混合吸热易产生气泡，而且长时间使用乙腈会使泵单向阀的宝石球黏在底座导致故障；甲醇的黏度高，洗脱能力稍弱，截至波长210nm，低波长时与水走梯度可能基线漂移严重，但是价格便宜，个别时候甲醇能够改变峰形。所以理应先考虑甲醇！
波长应考虑待测样品的最大吸收波长，兼顾杂质的紫外吸收情况，可以加校正因子计算。
该帖子作者被版主 v2960432加 3积分， 2经验，加分理由：详细阐明
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一片枫叶
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2015/3/14 16:56:48 28楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 golden1987(golden1987) 发表:
色谱纯的试剂经过0.2μm滤膜滤过，一般出去有紫外干扰的杂质，分析纯中含有紫外干扰的物质很多，使用分析纯的结果就是基线背景高，噪音大，掩盖杂质检测（尤其在低波长下），另外长时间使用分析纯的试剂，毁损伤仪器和色谱柱。
对于选择甲醇和乙腈，这个问题应该具体问题具体分析，理论上乙腈的粘度低，洗脱能力强，截至波长190nm，适合低波长下使用。但是乙腈的价格昂贵，毒性相比于甲醇大，与水混合吸热易产生气泡，而且长时间使用乙腈会使泵单向阀的宝石球黏在底座导致故障；甲醇的黏度高，洗脱能力稍弱，截至波长210nm，低波长时与水走梯度可能基线漂移严重，但是价格便宜，个别时候甲醇能够改变峰形。所以理应先考虑甲醇！
波长应考虑待测样品的最大吸收波长，兼顾杂质的紫外吸收情况，可以加校正因子计算。
很欣赏你的解读，望多参与交流讨论！
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