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毛细管电泳（CE）
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主题：【讨论】CE-SDS condition曲线不正常

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wy20071722
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2015/3/27 9:42:09 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lingyou(v2983592) 发表:
管子是同一根截出来的，缓冲液是贝克曼的成品试剂盒，试了同一批的两个盒。操作呢都是按照仪器带的方法没有改动。实验室有空调室温变化不大。真的不知道还有哪有问题啦！
又回头看了一下你说的情况，我觉得你可以把图贴出来。还有不影响样品检测的话说明电泳的基本过程是没有问题的，而刚开始的基线不稳定的话如果在接受范围内就不用管它，推测应该是检测方面的问题，或者是SDS溶液产生气泡，可以往这两个方向去考虑。注意仪器需要开机预热，不知道您的检测器是什么类型的？
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lingyou
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2015/3/27 14:29:54 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
又回头看了一下你说的情况，我觉得你可以把图贴出来。还有不影响样品检测的话说明电泳的基本过程是没有问题的，而刚开始的基线不稳定的话如果在接受范围内就不用管它，推测应该是检测方面的问题，或者是SDS溶液产生气泡，可以往这两个方向去考虑。注意仪器需要开机预热，不知道您的检测器是什么类型的？
我在第一页贴图了呀。我用的是贝克曼PA800plus，每天都是开机半小时之后再用的。SDS产生气泡，需要脱气吗？如果是检测问题，会是什么问题呢
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nini2006
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2015/3/27 15:08:52 23楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lingyou(v2983592) 发表:
我在第一页贴图了呀。我用的是贝克曼PA800plus，每天都是开机半小时之后再用的。SDS产生气泡，需要脱气吗？如果是检测问题，会是什么问题呢
所有buffer在使用前都要超声排气的，SDS就更不用说了。
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lingyou
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2015/3/27 15:18:54 24楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
所有buffer在使用前都要超声排气的，SDS就更不用说了。
从来米有排过～～超声时间有限制吗，时间长了会不会改变缓冲液性质。排气是在我用移液枪将buffer加入到进样小瓶之后进行吗？如果在之前，那经过移液枪吹吸是不是又会有气泡呢
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nini2006
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2015/3/27 23:34:47 25楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lingyou(v2983592) 发表:
从来米有排过～～超声时间有限制吗，时间长了会不会改变缓冲液性质。排气是在我用移液枪将buffer加入到进样小瓶之后进行吗？如果在之前，那经过移液枪吹吸是不是又会有气泡呢
所以当然是之后嘛，3-5min即可
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lingyou
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2015/3/30 8:17:04 26楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
所以当然是之后嘛，3-5min即可
之后啊？那是连进样盘一起放进超声里啊？我用的是1.5ml的小进样管。
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CEcret
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2015/4/1 11:07:24 27楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做CESDS的Gel Buffer不建议超声，避免气泡的方法是分离的时候在两端加气压。。。。
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lingyou
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2015/4/1 12:29:06 28楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
做CESDS的Gel Buffer不建议超声，避免气泡的方法是分离的时候在两端加气压。。。。
这都是经验啊～～cIEF的要超声不？样品要超声吗？
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threetigers107
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2015/4/17 16:08:39 29楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做CE-SDS时我是用负压脱气3-5min，如果用超声，超声机里的水反而会跑到样品管里面去，因为看到样品管里面变脏脏的了。。。脱气后基线会改善，这是我得经验
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lingyou
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2015/4/20 8:11:43 30楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 threetigers107(threetigers107) 发表:
做CE-SDS时我是用负压脱气3-5min，如果用超声，超声机里的水反而会跑到样品管里面去，因为看到样品管里面变脏脏的了。。。脱气后基线会改善，这是我得经验
我觉得超声不太好操作。是怎么个负压脱气法呢？用毛细管电泳仪的程序控制的吗？可不可以告诉我具体的操作步骤
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