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液相色谱（LC）

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主题：【求助】硫酸链霉素含量检测方法

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一滴雨露看大海

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发表于：2006/09/27 09:10:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请问谁有硫酸链霉素的含量分析方法（非效价法）？谢谢！

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2013/8/6 16:18:54 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 一滴雨露看大海(richard2050) 发表:

请问谁有硫酸链霉素的含量分析方法（非效价法）？谢谢！

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yzulcl

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2013/8/12 21:26:03 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

百度了一下“链霉素”，C18柱子应该不保留，紫外检测器应该很难检测。
建议考虑用HILIC分离，MS或者ELSD或者CAD检测器检测。自己开发方法吧。

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有水有渝

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2013/8/13 14:00:40 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

当前药典没有方法，可以参考有关物质测定方法开发出含量测定方法
有关物质照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.15mol/L的三氟醋酸溶液为流动相，流速为每分钟0.5ml，用蒸发光散射检测器检测（漂移管温度：110℃，载气流速：2.8L/min），取链霉素对照品适量，用水溶解并稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，置日光灯（3000Lx）下照射24小时，作为分离度试验用溶液。取妥布霉素对照品适量，用分离度试验用溶液溶解并稀释制成每1ml中约含妥布霉素0.06mg的溶液，量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。链霉素峰保留时间约为10～12分钟，链霉素峰（相对保留时间为1.0）与相对保留时间为0.9处的杂质峰的分离度和链霉素峰与妥布霉素峰的分离度分别应不小于1.2和1.5。连续进样5次，链霉素峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。
取该品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液适量，加水稀释制成每1ml中约含链霉素35μg、70μg和140μg的溶液，作为对照溶液⑴、⑵、⑶。照含量测定项下的色谱条件，量取对照溶液⑵10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%，精密量取对照溶液⑴、⑵、⑶各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以对照溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算回归方程，相关系数（r）应不小于0.99。另取供试品溶液，同法测定，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，用回归方程计算，最大单一杂质不得过2.0%，杂质总量不得过5.0%。

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