主题:【求助】在多糖类测定分子量时计算理论板数用的葡萄糖是单一的葡萄糖吗?

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kendon
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在多糖类测定分子量时,计算理论板数用的葡萄糖是药典上的分子量为198的葡萄糖吗?需要先进样测定葡萄糖的理论板数吗?
葡萄糖是小分子的,在凝胶色谱柱上 在最后出峰,与溶剂及小分子物质分不开,如何进行计算理论板数啊???


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tianru的爸爸
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药典要求的理论板数与一般色谱柱的板数计算方法是一样的,但含义不一样:
一般色谱柱的板数是指该柱在理论(最好)状态下的板数数,一般是色谱柱生产商提供的标准方法来测定计算的(包括:流动相、流速、柱温、检品及其浓度、检品缓冲液、以及何种检测器,及检测器的条件);
药典要求的理论板数是指在规定测定方法的条件下(该条件与规定测定方法相同,很明显与上面标准方法测定时的流动相、流速、柱温,甚至检测器都会不同,一般也不是最好的状态)测定计算的,计算理论板数的样品是指定的(如你这个问题中,就是葡萄糖)。

在测试样品前,可以测定理论板数,但最好用厂家提供的方法来测定,这样可以说明该柱是否合格;如果用葡萄糖来测定,可以说明该柱是否适用于该方法(多糖类测定分子量)。

在该方法中,实际上是用的葡萄糖所显示的峰来计算的,至于这个峰是否含有其它杂质,不重要了。但最终要求该峰计算出的理论板数要合格,否则就认为该柱不适用于该方法。(至于该色谱柱是否合格并无直接关系。)
max26495
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是葡萄糖么?我记得是葡聚糖,可以买到标品的,一个系列的,十个分子量,从小到大都有。
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